[发明专利]一种生物菌肥及其制备方法和防治白绢病、改良土壤环境的应用

权利要求书

1.一种生物菌肥，其特征在于，以质量份数计，包括：40份包埋菌体A和60份包埋混合菌体B；

所述包埋菌体A是以海藻酸钠包埋巨大假单胞菌制成，海藻酸钠与巨大假单胞菌的质量比为3:1；

所述包埋混合菌体B是以聚乙烯醇和海藻酸钠包埋Lysobacter yanansis SNNU513和解淀粉芽孢杆菌的混合菌制成，聚乙烯醇、海藻酸钠以及Lysobacter yanansis SNNU513和解淀粉芽孢杆菌的混合菌的质量比为7:6:1。

2.权利要求1所述的生物菌肥的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)分别取巨大假单胞菌、Lysobacter yanansis SNNU513菌和解淀粉芽孢杆菌，分别接种于LB培养基中，培养制备种子液；

2)按10％的接种量，将巨大假单胞菌种子液接种于发酵液A中，经培养制得含有巨大假单胞菌的发酵液，再经离心处理，制得巨大假单胞菌；

按10％的接种量，将Lysobacter yanansis SNNU513菌接种于发酵液B中，经培养制得含有Lysobacter yanansis SNNU513的发酵液，然后向该发酵液中按10％的接种量继续接种解淀粉芽孢杆菌，经培养制得含有两种菌的发酵液，再经离心处理，制得混合菌；

3)按1g:100ml的用量比，将巨大假单胞菌与3％海藻酸钠溶液混合均匀后，加入4％CaCl₂溶液，边滴边搅拌，形成固化小球，将固化小球在4℃交联固化24h，获得包埋巨大假单胞菌颗粒，将包埋巨大假单胞菌颗粒接种于发酵液A中，增殖培养，制得包埋菌体A；

4)配制3.5％聚乙烯醇与3％海藻酸钠混合液，然后与步骤2)制得的混合菌按照100ml:1g的用量比混合均匀，滴入饱和硼酸中，形成固化小球，4℃交联固化24h，获得包埋混合菌颗粒，将包埋混合菌颗粒接种于发酵液B中，增殖培养，制得包埋菌体B；

5)将包埋菌体A和包埋菌体B干燥后，按质量比4:6混匀，制得生物菌肥。

3.根据权利要求2所述的生物菌肥的制备方法，其特征在于，发酵液A中包含蔗糖10g/l、酵母膏5g/l和MgSO₄ 1g/l；发酵液B中包含蔗糖33g/l、酵母提取物4g/l、胰蛋白胨4.5g/l、(NH₄)₂SO₄ 9g/l、CO(NH₂)₂ 2g/l。

4.根据权利要求2所述的生物菌肥的制备方法，其特征在于，步骤1)中，三种菌株的培养条件均为37℃、180r/min培养18～20h；步骤2)中，巨大假单胞菌的培养条件为37℃、180r/min培养2d；Lysobacter yanansis SNNU513菌的培养条件为37℃、180r/min培养18h；加入解淀粉芽孢杆菌后，培养条件为37℃、180r/min培养1d；步骤3)和步骤4)中，增殖培养条件为30℃、180r/min培养3d；步骤2)中，离心是在4℃下，以6000r/min离心30min。

5.根据权利要求2所述的生物菌肥的制备方法，其特征在于，步骤3)中，按照(5～10)g:1L的接种量，将包埋巨大假单胞菌颗粒接种于发酵液A中；步骤4)中，按照(5～10)g:1L的接种量，将包埋混合菌颗粒接种于发酵液B中。

6.权利要求1所述的生物菌肥在改善土壤环境中的应用。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，所述生物菌肥能够吸附土壤中的重金属Cr²⁺、Cu²⁺和Pb²⁺。

8.如权利要求6所述的应用，其特征在于，所述生物菌肥能够将土壤中难溶性磷化合物转化为可溶性磷酸盐。

9.权利要求1所述的生物菌肥在防治植物白绢病中的应用，其特征在于，该生物菌肥能够防治由齐整小核菌(Sclerotium rolfsii)引起的植物白绢病。

10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，在播种期采用穴施的方法将所述生物菌肥施于种子附近。