[发明专利]白菜雌蕊发育相关基因BrCRF11a及其应用

说明书

本发明提供了白菜雌蕊发育相关基因BrCRF11a及其应用，属于植物基因工程技术领域。所述白菜BrCRF11a的DNA序列如SEQ ID No.1所示，该基因人工miRNA序列如SEQ ID No.2所示。通过农杆菌介导法将该基因及针对该基因设计的人工miRNA分别转入‘油青四九’菜心中，得到BrCRF11a过表达和抑制表达的转基因菜心株系，结果发现白菜BrCRF11a的表达变化会导致菜心出现嵌套花的表型，该表型是由于花分生组织持续保持干细胞活性所致。这表明白菜BrCRF11a与雌蕊发育关系密切，将该基因应用于白菜类及其他园艺植物育种，具有良好的应用前景。

技术领域

本发明属于植物基因工程技术领域，具体的说，涉及白菜BrCRF11a、其编码蛋白、其人工miRNA及其在花发育过程中的应用。

背景技术

白菜(Brassica rapa L.syn.B.campestris L.)属十字花科芸薹属芸薹种作物，主要包含有结球白菜、不结球白菜、芜菁、菜薹、紫菜薹、薹菜、乌塌菜、日本水菜等8个变种。它们不仅是重要的蔬菜和油料作物，在生产上有较高的经济价值，而且与十字花科模式植物拟南芥有较近的亲缘关系，在植物基础科学中也有重要研究意义。花的正常发育是被子植物的有性繁殖的基础，与植物的种子品质和数量息息相关。对于花发育相关机理的研究，在植物育种工作中具有重要的应用价值。

细胞分裂素响应因子(cytokinin response factor,CRF)是植物转录因子AP2/ERF大家族中的一个分支，因其对细胞分裂素的响应而得名。前人研究发现细胞分裂素在植物生长和发育的许多进程中均发挥重要作用，而CRF是植物体内细胞分裂素信号转导路径中的重要组分。目前，在许多细胞分裂素对植物的调控中均发现了CRF的参与，而CRF在花发育中的作用却鲜有报道。因此，研究CRF基因在植物花发育过程中的作用，对在基础科学研究中具有重要的理论意义，也在育种工作中有广泛的应用价值。

发明内容

本发明的目的是提供白菜BrCRF11a及其应用。

本发明提供了一种细胞分裂素响应基因BrCRF11a，该基因为：从来源于品种为‘Chiifu-401-42’的白菜的基因CRF11a克隆到的基因，其具有：

1)SEQ ID No.1所示的核苷酸序列；或

2)SEQ ID No.1所示的核苷酸序列经取代、缺失和/或增加一个或几个核苷酸；或

3)在严格条件下与1)限定的DNA序列杂交的核苷酸序列。

本发明提供了上述的白菜BrCRF11a的人工miRNA(amiR)，其具有：

1)SEQ ID No.2所示的核糖核苷酸序列；或

2)与1)限定的RNA序列对应的脱氧核糖核苷酸序列。

本发明提供了含有上述白菜BrCRF11a或其amiR的生物材料，所述生物材料为表达载体，表达盒，宿主细胞或工程菌。

本发明提供了上述白菜BrCRF11a或其amiR或其相应的生物材料在调控白菜花发育中的应用。

本发明提供了上述白菜BrCRF11a或其amiR或其相应的生物材料在制备转基因白菜中的应用。

本发明提供了上述白菜BrCRF11a或其amiR或其相应的生物材料在白菜种质资源改良中的应用。