[发明专利]一种检测畜禽肉制品中碱性着色剂的方法

说明书

本发明公开了一种检测畜禽肉制品中碱性着色剂的方法，该方法利用提取液进行待检测样品的提取，并将提取后获得的上清液经WCX固相萃取柱净化，以完成样品前处理，然后应用超高效液相色谱‑串联四极杆线性离子阱质谱仪，建立了畜禽肉制品中7种碱性着色剂同时筛查、确证的检测方法，该检测方法具有操作简单、通量高效、定性准确、灵敏度高、环境友好等特点，适合用于肉制品中多种碱性着色剂的筛查、确证，避免假阳性样品的检出。

技术领域

本发明公开涉及着色剂检测的技术领域，尤其涉及一种检测畜禽肉制品中碱性着色剂的方法。

背景技术

肉色是肉品外观评定的重要指标，人们通常通过肌肉的表象很容易地用视觉加以鉴别，因此由表及里地判断肉的品质。肉色的优劣直接决定了市场上消费者的购买行为，因此，肉色成为肉品定价的决定性因素。一些肉制品生产加工企业为了使肉制品的色泽鲜艳，增强消费者的购买欲和食欲，或者为了掩盖原料肉的不新鲜，而在肉制品中加入着色剂，而有些不法生产厂商甚至违法添加工业染料。

人工合成着色剂由于着色力强、不易褪色、价格低廉等特点，因而被肉制品生产商广泛应用。人工合成着色剂按其酸碱性可以分为酸性着色剂和碱性着色剂，碱性着色剂例如罗丹明B等在熟肉制品中的违法添加时有报道，但人工合成着色剂具有致癌、致畸等潜在危害，长期食用会对人体健康造成危害，所以对合成着色剂的添加必须加以控制。

目前，着色剂的检测方法主要有液相色谱法(LC)以及液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)等。其中，LC法灵敏度较低，对疑似阳性样品无法进行确证；虽然LC-MS/MS方法，具有定性准确、灵敏度高等优点，但都是针对目标化合物的检测，无法实现多种着色剂的同时筛查，而且还会出现假阳性样品的检出，存在检测效率低、以及检测结果不准确的问题。

因此，研发一种有关着色剂的检测方法，不仅可以实现多种着色剂的同时检测，以提高检测效率，而且还可以实现检测、确证，提高检测结果的准确性，成为人们亟待解决的问题。

发明内容

鉴于此，本发明提供了一种检测畜禽肉制品中碱性着色剂的方法，以至少解决现有着色剂检测方法无法实现多种着色剂同时检出，导致被检测样品需要重复处理，分别检测，耗时费力，检测效率低等问题。

本发明提供的技术方案，具体为，一种检测畜禽肉制品中碱性着色剂的方法，该方法包括如下步骤：

1)样品前处理：

称取样品放置于离心管中，加入提取液后，进行振荡提取、离心，收集上清液后，再加入提取液重复提取一次，收集上清液，将两次上清液合并；

将上清液经WCX固相萃取柱净化，浓缩、定容后，备用；

2)定性分析：

运用UPLC-MS/MS-Qtrap法对经过样品前处理的待检测畜禽肉制品样品进行筛查，采用液相色谱-串联四极杆线性离子阱质谱仪的增强子离子扫描功能，建立MRM-IDA-EPI筛查方法，获得待检测畜禽肉制品样品中各目标着色剂母离子的MS²谱图；

用已知数据库中各化合物的标准MS²谱图与获得待检测畜禽肉制品样品中各目标着色剂的母离子MS²谱图分别进行对比，获得相似度值，并匹配两者的特征碎片离子，进而判断待检测畜禽肉制品样品中是否含有目标碱性着色剂；

3)定量分析：

分别称取各碱性着色剂标准品，用甲醇分别配制10μg/mL的标准储备液，备用；

按照步骤1)中样品前处理方法对空白样品进行处理后，用空白样品基质溶液稀释标准储备液，制成混合标准储备溶液；

将混合标准储备溶液定容后，得到空白样品基质溶液，配制浓度为0.05μg/mL～5.0μg/mL的系列匹配标准工作溶液；