[发明专利]拟南芥eIF5B1基因在提高菊花耐高温性中的应用

说明书

拟南芥eIF5B1基因在提高菊花耐高温性中的应用。所述拟南芥eIF5B1基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明的拟南芥eIF5B1基因可用于培育耐高温菊花良种，通过在转基因菊花中表达上述的拟南芥eIF5B1基因可大大提高菊花的耐高温性，在培育耐高温菊花育种技术领域具有较好的应用前景。

技术领域

本发明涉及分子生物学、基因工程领域，具体地涉及拟南芥eIF5B1基因在提高菊花耐高温性中的应用。

背景技术

高温是影响菊花生长发育、生殖和产量的重要逆境因子之一。高温导致菊花激活一些特异细胞或组织的细胞程序性死亡，该过程会导致叶片脱落，幼苗迅速失绿直至死亡，导致花期的花器官变小、花药不开裂、花粉活性降低、花粉生长素含量显著降低等，严重时会导致花或果实的不能形成，甚至整株植株死亡。提高菊花的耐高温性对于增强菊花的耐逆性具有重要意义。

发明内容

作为本发明的一个方面，提供了拟南芥eIF5B1基因，其核苷酸序列为下列序列之一：

(1)如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列；

(2)如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列经添加、替换、插入或缺失一个或几个核苷酸而成的同源序列；

(3)如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列的等位基因或所述等位基因衍生物的核苷酸序列。

本发明还提供了一种表达载体，其含有上述拟南芥eIF5B1基因全序列或部分片段。

本发明还提供了一种转基因细胞系，其含有上述拟南芥eIF5B1基因的全序列或部分片段。

本发明还提供了一种工程菌，其含有上述拟南芥eIF5B1基因的全序列或部分片段。

本发明还提供了上述拟南芥eIF5B1基因在提高菊花耐高温性中的应用。

本发明还提供了上述拟南芥eIF5B1基因在制备转基因菊花中的应用。

本发明还提供了上述拟南芥eIF5B1基因在菊花种质资源改良中的应用。

本发明还提供了用于PCR扩增上述拟南芥eIF5B1基因的引物，其特征在于，其序列如SEQ ID No.2-3所示。

本发明还提供了一种制备耐高温转基因菊花的方法，其通过在转基因菊花中表达上述的拟南芥eIF5B1基因实现。

本发明的有益效果：本发明的拟南芥eIF5B1基因可用于培育耐高温菊花良种，通过在转基因菊花中表达上述的拟南芥eIF5B1基因可大大提高菊花的耐高温性，在培育耐高温育种技术领域具有较好的应用前景。

附图说明

图1为pCB308R的T-DNA区的组成及35S及eIF5B1的插入位置；

图2为Western Bloting检测蛋白表达情况其中，WT为未转基因愈伤，T为转基因愈伤；M：Marker；

图3为RT-PCR检测转基因表达情况，其中，WT为未转基因愈伤，T为转基因愈伤；M：Marker；

图4为转基因愈伤GUS染色结果；

图5为高温胁迫结果照片，其中，A和C为40℃处理的未转基因愈伤，B和D为40℃处理的转eIF5B1基因愈伤，E和F为35℃处理的转eIF5B1基因愈伤。

具体实施方式：

本发明提供的项目实施方案用于说明本发明，但是不局限于本发明的范围。如果没有特别指出，本发明实施中的技术手段为本研究领域的常用技术，所用原料为市场所购。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。