[发明专利]诱导藻细胞高效合成虾青素的方法有效
申请号: | 201811607855.5 | 申请日: | 2018-12-27 |
公开(公告)号: | CN109554429B | 公开(公告)日: | 2021-06-04 |
发明(设计)人: | 景斐;丁月晗;曾善美 | 申请(专利权)人: | 浙江海洋大学 |
主分类号: | C12P23/00 | 分类号: | C12P23/00;C12R1/89 |
代理公司: | 北京国翰知识产权代理事务所(普通合伙) 11696 | 代理人: | 卫翠婷 |
地址: | 316000 浙江省舟山市普陀区*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 诱导 细胞 高效 合成 虾青素 方法 | ||
1.马来酸二钠盐作为发酵助剂在诱导藻细胞高效合成虾青素中的应用,其特征在于包括:
取细胞密度不低于25g/L的浓缩雨生红球藻(Haematococcus Pluvialis)藻液,1~2℃温度下,按照重量比1~8:1的比例将冻存液加入到浓缩藻液中,搅拌离心去除上清液,得到藻泥,在-5~-10℃预冷冻后迅速转入-25~-55℃冷冻保藏;在持续的420~440nm波长、1500~6000μW/cm2辐射强度的蓝光辐照条件下对藻液诱导培养,然后以葡萄糖作为碳源,加入0.22~0.28g/L发酵助剂马来酸二钠盐对雨生红球藻进行振荡发酵完成诱导;
所述冻存液含有0.1~1.2wt%1-丁醇和0.05~0.06wt‰L-阿糖醇的水溶液。
2.诱导藻细胞高效合成虾青素的方法,其特征在于包括:
a)沉降并浓缩处于对数生长期的雨生红球藻(Haematococcus Pluvialis)藻液,得到细胞密度不低于25g/L的浓缩藻液;
b)1~2℃温度下,按照重量比1~8:1的比例将冻存液加入到浓缩藻液中,搅拌离心去除上清液,得到藻泥,在-5~-10℃预冷冻后迅速转入-25~-55℃冷冻保藏;
c)420~440nm波长、1500~6000μW/cm2辐射强度的的蓝光辐照下诱导培养藻液;
d)在含有葡萄糖的无碳源组合培养基中加入0.22~0.28g/L发酵助剂马来酸二钠盐对雨生红球藻进行振荡发酵完成诱导;
所述冻存液含有0.1~1.2wt%1-丁醇和0.05~0.06wt‰L-阿糖醇的水溶液。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于:所述诱导培养时,pH是6.8~7.5,培养温度是16~24℃,培养时间是10~18d。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:所述控制pH时的缓冲体系是2-苯基苯并咪唑-5-磺酸。
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