[发明专利]增强CAR-T细胞归巢到实体肿瘤组织能力的试剂及其应用

说明书

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种CAR‑T细胞、一种增强CAR‑T细胞归巢到实体肿瘤组织能力的试剂及其应用。所述试剂为DPP4抑制剂，包括但不限于西格列汀、维格列汀、沙格列汀、阿格列汀和利格列汀。所述CAR‑T细胞表达包含ScFv、铰链结构和跨膜结构和胞内活化信号域的嵌合抗原受体(CAR)，所述铰链结构的氨基酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.5所示。本发明提供了所述DPP4抑制剂的参与肿瘤治疗的新用途，所述试剂可增强所述CAR‑T细胞的肿瘤归巢和肿瘤富集能力，提高CAR‑T疗法对实体肿瘤的治疗效果。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种CAR-T细胞、一种增强CAR-T细胞归巢到实体肿瘤组织能力的试剂及其应用。

背景技术

CAR-T全称是嵌合抗原受体T细胞免疫疗法，其在血液系统瘤中取得较好的成绩，但CAR-T在实体瘤中的效果不如血液系统瘤，其主要原因之一是因为CAR-T较难进入实体瘤内部，并且实体瘤异质性高，实体瘤靶点往往在正常组织也有所表达，如果CAR-T细胞不能“精准”的靶向肿瘤组织，存在脱靶风险等安全问题，这些都影响CAR-T细胞在实体瘤治疗的疗效。因此，提高CAR-T细胞肿瘤归巢能力和浸润能力很有必要。

DPP4又称CD26，是一种具有多种生物学功能的跨膜丝氨酸蛋白酶。膜结合型CD26是T细胞活化的标志物之一，在活化T细胞上的表达量显著增加。作为一种共刺激分子，CD26能够与多种细胞表面或者细胞内的分子相互作用，参与T细胞信号转导过程，CD26对T细胞的影响还处于研究阶段，目前仅有抗CD26抗体对T细胞的活化有较多的研究，但是需要比抗CD3抗体或抗TCR抗体等常规T细胞活化抗体更高的抗体浓度。

CD26抑制剂也就是DPP4抑制剂能够抑制DPP4对胰高血糖素样肽(GLP)和葡萄糖依赖性促胰岛素分泌多肽(GIP)等肠促胰岛素的剪切，有效控制血糖，现已成为一种重要的抗糖尿病药物。但是，目前对于DPP4在不同肿瘤中的生物学功能及其作用机制仍不十分明确。

针对DPP4能够与多种细胞表面或者细胞内的分子相互作用的特点，为提高CAR-T细胞肿瘤归巢能力和浸润能力，降低脱靶风险等安全问题，本发明申请利用DPP4抑制剂联合CAR-T细胞免疫治疗技术提高CAR-T细胞治疗实体瘤的效果。

发明内容

本发明的目的之一在于提供一种CAR-T细胞。

为实现上述目的，本发明所用以下方案：

一种CAR-T细胞，所述CAR-T细胞表达包含胞外抗原识别区和胞内活化信号域的嵌合抗原受体(CAR结构)，所述胞外抗原识别区包括ScFv、铰链结构和跨膜结构，所述铰链结构的氨基酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.4或SEQ IDNO.5所示。

在某些实施例中，所述CAR结构中铰链区序列可以来源于：IgG、IgD、CD8、CD7、CD4。

进一步，所述CAR结构的跨膜区的氨基酸序列如SEQ ID NO.6或SEQ ID NO.7所示。

在某些实施例中，所述CAR结构中跨膜区可以来源于：CD8、CD28、CD3ε、CD4、CD16、CD137、CD80以及CD86。

进一步，所述CAR结构的胞外抗原识别区的氨基酸序列如SEQ ID NO.11或SEQ IDNO.13所示。