[发明专利]一种副鸡禽杆菌的灭活方法

说明书

本发明提供了一种副鸡禽杆菌菌液灭活的方法，属于菌液灭活工艺领域。其灭活方法为50‑65℃，搅拌灭活30‑45分钟，而后放入2‑8℃，冷藏保存3日后即可灭活彻底。本发明灭活工艺简便、时间短、灭活彻底，可有效避免因加入灭活剂后对抗原免疫原性和疫苗安全性的不良影响，对疫苗生产工艺及品质提升有明显改善。

技术领域

本发明属于兽用生物制品生产工艺领域，尤其是菌液灭活工艺领域。

背景技术

鸡传染性鼻炎是由副鸡禽杆菌引起的一种鸡急性上呼吸道传染病。该病单独发生时，可引起蛋鸡产蛋量下降，育成鸡生长发育受阻和淘汰率增加，死亡率一般不高，但与鸡毒支原体病、鸡痘、传染性支气管炎、传染性喉气管炎并发时，会使症状加重、病程延长和死亡率增加，肉鸡发生该病时会引起严重的肉质下降，死淘率增加，造成很大的经济损失。

目前，对于鸡传染性鼻炎的防治主要采取药物或疫苗免疫两种方法，其中药物疗法存在许多弊病，因为药物的原形或其代谢产物及有关杂质可能蓄积、残留在动物的组织、器官或食用产品中，这样便造成了兽药在动物性食品中的残留，对人体造成严重的危害。所以当前治疗鸡传染性鼻炎的副鸡禽杆菌疫苗仍是首选。

在疫苗生产过程中，灭活无疑是最重要的环节之一，兽用生物制品生产中的灭活是指破坏微生物的生物学活性、繁殖能力和致病性，但尽可能不影响其免疫原性，目前最常见的副鸡禽杆菌的灭活工艺可以概括为：先加入灭活剂，再加入菌液，2-8℃灭活，周期为5-10天，常用灭活剂包括甲醛、硫柳汞等；通常情况下，甲醛作为灭火剂具有破坏免疫原性，高度致癌性等缺点，硫柳汞中的汞属于重金属，长期使用会造成汞富集，存在重金属中毒风险。其他的灭活剂剂量虽然不高，但也有残留的风险，和药物疗法一样也会有损人类的健康。

发明内容

本发明的目的还在于解决了因加入灭活剂后对疫苗安全性和在动物体内灭活剂残留的问题。

本发明的目的在于提供了一种新型菌液灭活工艺，以解决现有技术中副鸡禽杆菌菌液的灭活周期长的技术问题。

为实现以上技术目的，本发明采用如下技术方案：

一种副鸡禽杆菌发酵菌液灭活方法，其具体步骤为：

收集培养的副鸡禽杆菌并重悬得到重悬液，将重悬液置50℃-65℃环境中恒温灭活；恒温灭活后的重悬液置于低温环境中不低于24h。

进一步的，所述的生理盐溶液为生理盐水或磷酸盐缓冲液；

进一步的，所述的高温灭活是指将重悬液置于60℃-65℃环境中恒温灭活；

进一步的，所述的高温灭活是指在60℃-65℃的环境下水浴恒温灭活。

进一步的，所述的60℃-65℃环境恒温的灭活过程中需要震荡混匀；

进一步的，所述的60℃-65℃环境恒温的灭活时间为30-45分钟。

进一步的，所述的低温静置的低温环境为2-8℃。

进一步的，所述的低温静置时长为24-96h。

更进一步的，所述的低温静置时长为72h。

采用上述技术方案，本发明具有的有益效果为：

1.用高温灭活配合低温放置的工艺代替引入灭活剂的工艺，克服了现有技术中出现灭活剂残留的问题，提高了灭活疫苗的安全性，降低了副鸡禽杆菌灭活工艺的成本。

2.选择先高温灭活再低温放置的工艺有效的提高了副鸡禽杆菌疫苗的免疫活力。

具体实施方式