[发明专利]39E DNA酶及其应用

权利要求书

1.一种39E DNA酶，其特征在于，具有：

左区、核心区以及右区，

所述左区的3’端与所述核心区的5’端相连，所述核心区的3’端与所述右区的5’端相连，所述核心区的A₂₀与C₂₁之间连接有连接体，所述连接体通过羟基与A₂₀的磷酸基团相连，所述连接体通过磷酸基团与C₂₁的5’端羟基相连。

2.根据权利要求1所述的39E DNA酶，其特征在于，所述连接体的长度不超过预定长度，所述预定长度相当于以碳碳单键相连的12个碳原子形成的碳链长度；

任选地，所述连接体包括选自C3 Spacer、Spacer 6、Spacer 9、dSpacer、二巯基化物、脱硫生物素、辛二炔基、氨基修饰物、开环核苷酸的至少之一；

优选地，所述连接体为C3 Spacer、Spacer 6、Spacer 9或dSpacer；

优选地，所述脱硫生物素为所述辛二炔基为所述氨基修饰物为

任选地，所述C3 Spacer为所述Spacer 6为所述Spacer 9为所述dSpacer为

任选地，所述连接体进一步具有胸腺嘧啶修饰；

任选地，所述胸腺嘧啶修饰包括选自胸腺嘧啶、叠氮修饰的胸腺嘧啶、生物素修饰的胸腺嘧啶、氨基修饰的胸腺嘧啶、超T结构修饰的胸腺嘧啶、荧光团修饰的胸腺嘧啶的至少之一的插入；

任选地，所述连接体进一步具有脱氧胸腺嘧啶修饰；

任选地，所述脱氧胸腺嘧啶修饰包括选自脱氧胸腺嘧啶、叠氮修饰的脱氧胸腺嘧啶、生物素修饰的脱氧胸腺嘧啶、氨基修饰的脱氧胸腺嘧啶、超T结构修饰的脱氧胸腺嘧啶、荧光团修饰的脱氧胸腺嘧啶的至少之一的插入；

任选地，所述连接体进一步具有尿嘧啶修饰；

任选地，所述尿嘧啶修饰包括选自尿嘧啶、2’-氟修饰的尿嘧啶、5-溴修饰的尿嘧啶的至少之一的插入；

任选地，所述连接体进一步具有脱氧尿嘧啶修饰；

任选地，所述脱氧尿嘧啶修饰包括选自脱氧尿嘧啶、2’-氟修饰的脱氧尿嘧啶、5-溴修饰的脱氧尿嘧啶的至少之一的插入。

3.一种增强39E DNA酶活性的方法，其特征在于，包括：

将连接体插入所述39E DNA酶序列A₂₀与C₂₁位点之间，所述连接体通过羟基与A₂₀的磷酸基团相连，所述连接体通过磷酸基团与C₂₁的5’端羟基相连，以便增强39E DNA酶活性。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述连接体如权利要求2所限定的。

5.一种复合探针，其特征在于，包括：

核心区，所述核心区由39E DNA酶的核心区构成；

双链区，所述双链区由39E DNA酶的左区和右区与底物39S互补配对形成；

其中，所述39E DNA酶如权利要求1～2任一项所限定的。

6.根据权利要求5所述的复合探针，其特征在于，所述39E DNA酶的左区和右区与所述底物39S互补配对的区域长度分别独立地为3～20个碱基；

任选地，进一步包括：荧光团和淬灭团，所述荧光团设置在所述底物39S的一端，所述淬灭团设置在所述底物39S的另一端和/或与所述荧光团靠近的所述39E DNA酶的一端。

7.根据权利要求5所述的复合探针，其特征在于，进一步包括：荧光小分子；

任选地，所述复合探针的双链区具有缺碱基位点，所述荧光小分子设置在所述缺碱基位点处；

任选地，所述缺碱基位点是由dSpacer或C3 Spacer插入到所述双链区形成的。

8.一种检测待测样品中铀酰离子含量的方法，其特征在于，利用权利要求5～7任一项所述的复合探针对待测样品进行检测，以便获得待测样品中铀酰离子的含量。