[发明专利]一种猕猴桃金梅的组培快繁方法

说明书

本发明公开了一种猕猴桃金梅的组培快繁方法，步骤包括：①获取无菌苗；②不定芽再生；③不定芽增殖、壮苗培养；④生根培养；⑤移栽；其特征在于：包括萌发培养基、再生培养基、增殖壮苗培养基和生根培养基及相应的培养条件。本发明采用四种针对性培养基对金梅进行组织培养，能在短期内实现快速繁育大量金梅猕猴桃种苗的需求，并且通过组织培养能最大限度地保证种苗质量，提高种苗繁育速度，实现种苗工业化生产，满足生产上对金梅种苗的需求；直接组培品种种苗，建立品种采穗圃，打破传统嫁接繁殖中嫁接接穗的量的瓶颈，充分满足生产的需要。

技术领域

本发明涉及一种猕猴桃品种组培快繁方法，尤其涉及金梅猕猴桃品种组培快繁方法。

背景技术

金梅是中国科学院武汉植物园于2002年采用‘金艳’与中华红肉猕猴桃雄株杂交，从F1代群体中筛选出的优株，经过10年的子代鉴定和区域试验选育而来，于2013年申请农业新品种保护。果实长扁椭圆形，上小下大，平均果重约90克，果皮绿褐色，果面短绒毛。果肉黄色或黄绿色，味浓甜、香气浓郁，质嫩，多汁，口感佳。果实软熟后可溶性固形物平均含16%，干物质15%，维C125毫克/100毫克，矿质元素丰富，含氮0.15%、钾0.18%、钙34毫克/千克，果实较耐储藏，货架期5-7天。树势较旺，萌芽率58%，果枝率80%。嫁接第四年平均株产38千克，丰产、稳产。目前金梅种苗来源主要为嫁接，通过组织培养获得金梅种苗在方法技术上尚属空白，本发明采用组织培养的方法，在保证种质质量的前提下快速有效的保存、繁育金梅种苗，实现其工厂化育苗生产，满足市场上对金梅种苗的需求。目前市场主要采用嫁接和扦插方法繁殖金梅种苗，扦插成活率低，嫁接接穗数量的限制，使金梅大面积推广面临种苗来源不足的难题。

发明内容

针对现有技术中存在的缺陷，本发明的目的就在于提供一种猕猴桃金梅的组培快繁方法，即直接通过组织培养方法获得品质均一、优良的离体金梅组培种苗，并通过优化离体快繁体系，实现快速繁育金梅猕猴桃优质种苗的目的，以供生产中不断增长的种苗需求。

本发明采取的技术方案如下：

以金梅一年生枝条水培萌芽为外植体，消毒后进行组织培养，获得无菌苗，以无菌苗叶片为再生组织来源，进行诱导分化、生根培养。不定芽直接再生率高达92%，增值系数可达4.3。短期内可快速获得大量优质品种种苗，实现金梅种苗工厂化快速育苗。

具体地说，本方法包括下列步骤：

①无菌苗的获得

1）于11月底从金梅母树上剪取生长健壮腋芽饱满的一年生枝条，将枝条剪成30cm长枝段，每段5-10芽；

2）将所述枝段形态学上端用封口膜封好，形态学下端浸泡2‰蔗糖水溶液中室内培养，保持环境温度25±2℃，保证室内清洁，2-3天更换一次水溶液，两周后，腋芽萌出；

3）待腋芽芽体长至1-2cm时，取幼嫩芽体于超净工作台上，置于灭过菌的空瓶内，75%酒精表面消毒1min，倒出酒精，加入质量体积比为0.1%升汞深入消毒6-10min，升汞溶液与外植体充分接触震荡，保证消毒彻底，倒出消毒液，外植体更换入新的灭菌瓶内，无菌水震荡冲洗4-5次，再于灭菌滤纸上晾干；

4）去掉腋芽芽体基部的伤口及损伤的叶片，接种于外植体萌发培养基上；

5）30-40天后，芽体展叶，生长健壮，获得无菌苗；

②不定芽再生诱导

1）于超净工作台上切取无菌苗幼嫩叶片，切成0.5*0.5cm叶盘，置于再生培养基上，pH调至5.8，进行不定芽的再生诱导；

2）接种材料置于光照条件下培养；

3）40-50天后，叶片直接再生不定芽；

③不定芽增殖、壮苗培养