[发明专利]雪梨膏的指纹图谱检测方法

权利要求书

1.一种雪梨膏的指纹图谱检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1、雪梨膏供试品溶液的制备：

取待测雪梨膏至容量瓶中，加入甲醇，超声处理后加甲醇至刻度线，静置，取上清液用0.45μm有机微孔滤膜滤过，取续滤液，即得；

步骤2、混合对照品溶液的制备：

分别取绿原酸、橙皮苷对照品适量，精密称定，分别置于容量瓶中，加甲醇分别配成对照品储备液；然后分别精密吸取绿原酸和橙皮苷的对照品溶液适量，加甲醇定容至10ml，制成绿原酸和橙皮苷的混合对照品溶液；

步骤3、分别精密吸取步骤1的雪梨膏供试品溶液和步骤2的混合对照品溶液，注入高效液相色谱仪，记录色谱图；

步骤4，将步骤3中获得的雪梨膏供试品溶液的指纹图谱导出，并导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A；选择不同批次雪梨膏的色谱图中均存在的色谱峰作为共有峰；用平均值计算法生成雪梨膏的对照指纹图谱，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积；并根据混合对照品溶液色谱图的保留时间标注对照指纹图谱中峰的化学成分；

所述的步骤3高效液相色谱仪检测的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以含0.1％体积醋酸的水作为流动相A，以乙腈为流动相B，梯度洗脱，流速为0.5～1.5ml·min-1，柱温25～40℃，检测波长200～360nm；

梯度洗脱优选如下表：

时间/min	流动相A体积百分比	流动相B体积百分比
0	95	5
15	91	9
45	90	10
55	40	60
70	40	60
80	0	100

。