[发明专利]一种蜂毒素脂质体纳米制剂及其制备方法与应用

说明书

本发明属于新型纳米药物制剂技术领域，具体涉及一种蜂毒素脂质体纳米制剂及其制备方法与应用。本发明所述蜂毒素脂质体纳米制剂，含有蜂毒素脂质体，所述蜂毒素脂质体至少包括：蜂毒素，阴离子聚合物和阳离子脂质载体。具有材料安全易得、制备操作简单、可重复性强的特点；脂质体制剂粒径大小和均一性理想、载药量大、制剂稳定、易于保存、蜂毒素泄漏少、无溶血作用、毒性低、具有生物可降解特性、可功能化修饰、具有在循环系统中的长循环和肿瘤的主被动靶向分布功能等特点，可进行规模化生产。

技术领域

本发明属于新型纳米药物制剂技术领域，具体涉及一种蜂毒素脂质体纳米制剂及其制备方法与应用。

背景技术

蜂毒素(Melittin)是蜂毒(Vonem)中的主要活性物质，约占蜂毒干重的40％，是一个由26个氨基酸组成的多肽分子(NH2-GIGAVLKVLTTGLPALISWIKRKRQQ-CONH2)，蜂毒素的分子量为2846Dal，具有两亲性，易溶于水，在生理条件下带有6个正电荷。蜂毒素单体的二级结构中有2个α-螺旋结构，中间由铰链结构相连，C末端为正电荷区域。蜂毒素在水中存在两种形式，即在低浓度、低离子强度时为单体的自由结构，而在高浓度、高离子强度时则形成四聚体形式。蜂毒素本身具有很强的药理活性，在抗菌、抗病毒、抗炎症、抗肿瘤和免疫调节等方面发挥着巨大的作用。如蜂毒素可通过破坏细胞线粒体膜，参与抗肿瘤免疫应答或通过如作用于Caspases途径、Bcl-2和BaX蛋白表达等诱导肿瘤细胞的凋亡，在黑色素瘤、肝癌、肺癌、乳腺癌等治疗中具有很好的功效，在肿瘤等疾病的临床治疗方面显示出非常大的潜力。

目前，蜂毒素在发展和用于炎症、肿瘤和细菌及病毒感染等疾病的临床治疗过程中还存在许多问题，如：蜂毒素分子本身特殊的α-螺旋结构使其与磷脂膜具有很强的亲和力，极易插入脂质双分子膜并在细胞膜上致孔，因此游离的蜂毒素具有很强的溶血效应和组织毒性，而这种溶血副作用和组织毒性是其走向临床的最主要障碍之一；另外，蜂毒素作为一种多肽药物，极易在给药后在循环系统或组织中被降解代谢，或因所带电荷被其他蛋白或分子等吸附结合，从而导致低生物利用度及潜在的毒性。

基于上述问题，开发并利用蜂毒素用于临床疾病治疗急需开发出具有载荷效率高、稳定性好、毒性低、循环时间长、生物利用度高等特点的制剂。

发明内容

为了克服现有技术中所存在的问题，本发明的目的在于提供一种适用于蜂毒素临床应用的脂质体纳米制剂及其制备方法与应用。

为了实现上述目的以及其他相关目的，本发明采用如下技术方案：

本发明的第一方面，提供一种蜂毒素脂质体纳米制剂，含有蜂毒素脂质体，所述蜂毒素脂质体至少包括：蜂毒素，阴离子聚合物和阳离子脂质载体。

在一种实施方式中，所述蜂毒素和阴离子聚合物结合形成蜂毒素-阴离子聚合物纳米颗粒，所述阳离子脂质载体可形成脂质双分子膜，所述蜂毒素脂质体包括外层结构和内核结构，所述外层结构包括脂质双分子膜，所述内核结构包括蜂毒素-阴离子聚合物纳米颗粒。

在一种实施方式中，所述蜂毒素-阴离子聚合物纳米颗粒中，所述阴离子聚合物与所述蜂毒素的质量比为0.1:1～4:1。可选的，为0.8:1～3:1。

在一种实施方式中，所述蜂毒素脂质体中，所述阳离子脂质载体与所述蜂毒素-阴离子聚合物纳米颗粒的质量比为2:1～10:1。

在一种实施方式中，所述阴离子聚合物为所含净电荷为负的聚合物分子。

在一种实施方式中，所述阴离子聚合物可为通过化学合成或生物分离获得的聚合物分子。

在一种实施方式中，所述阴离子聚合物可以是由相同单体或不同单体缩聚而成的，具有相同或不同聚合度的分子。

在一种实施方式中，所述阴离子聚合物选自生物可降解的阴离子聚合物。