[发明专利]一种从螺旋藻中提取藻蓝蛋白的方法在审
| 申请号: | 201811364103.0 | 申请日: | 2018-11-16 |
| 公开(公告)号: | CN109456406A | 公开(公告)日: | 2019-03-12 |
| 发明(设计)人: | 李悦明;况新宇;夏修峦;许丽娜;李娜;毕作成;徐建春 | 申请(专利权)人: | 青岛科海生物有限公司 |
| 主分类号: | C07K14/795 | 分类号: | C07K14/795;C07K1/34 |
| 代理公司: | 青岛智地领创专利代理有限公司 37252 | 代理人: | 张红凤 |
| 地址: | 266400 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 藻蓝蛋白 螺旋藻 硫酸铵晶体 混悬液 饱和度 硫酸铵溶液 理论和实验研究 蛋白提取 工艺条件 螺旋藻粉 喷雾干燥 破壁处理 运行成本 粗提物 水混合 粗品 环保 优化 生产 | ||
1.一种从螺旋藻中提取藻蓝蛋白的方法,其特征在于,依次包括以下步骤:
a取螺旋藻粉,向其中加入一定量的水充分混匀后得到螺旋藻粉混悬液,将螺旋藻粉混悬液冻融、离心,得上清液;
b向步骤a所得上清液中分两步加入硫酸铵晶体,第一步加入硫酸铵晶体后离心取上清液,第二步向第一步所得上清液中加入硫酸铵晶体,离心分离得藻蓝蛋白粗提物;其中,第一步加入硫酸铵晶体后硫酸铵溶液饱和度为20%,第二步加入硫酸铵晶体后硫酸铵溶液饱和度为40%;
c将步骤b所得藻蓝蛋白提取物溶于其质量5~10倍的PBS缓冲溶液中,置于透析袋中于透析,收集透析袋中的溶液,得透析液;
d将步骤c所得透析液喷雾干燥,即得藻蓝蛋白粉。
2.根据权利要求1所述的一种从螺旋藻中提取藻蓝蛋白的方法,其特征在于:步骤a中,水的加入量为螺旋藻粉质量的16~18倍,螺旋藻粉混悬液冻融、离心步骤具体为:将螺旋藻粉混悬液置于-20℃冷冻6h,于60℃水浴锅隔水加热融化,20℃条件下3000~4000r/min离心得上清液,所得上清液再置于-20℃冷冻融6h,于60℃水浴锅隔水加热融化,20℃条件下3000~4000r/min离心得上清液。
3.根据权利要求1所述的一种从螺旋藻中提取藻蓝蛋白的方法,其特征在于:步骤a中,所述的螺旋藻粉是经破壁处理、过20目筛制备得到的。
4.根据权利要求1所述的一种从螺旋藻中提取藻蓝蛋白的方法,其特征在于:步骤b中,第一步和第二步离心分离条件为:温度10~30℃,转速3000~4000r/min。
5.根据权利要求1所述的一种从螺旋藻中提取藻蓝蛋白的方法,其特征在于:步骤c中,所述PBS缓冲液为水、氯化钠、氯化钾、磷酸氢二钠和磷酸二氢钾组成的缓冲溶液,调节pH为6.9~7.2。
6.根据权利要求1所述的一种从螺旋藻中提取藻蓝蛋白的方法,其特征在于:步骤c中,透析温度为2~6℃,通过磁力搅拌器旋转进行透析,磁力搅拌器转速为400~800r/h。
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