[发明专利]一种通络化痰胶囊的检测方法

说明书

本发明公开了一种通络化痰胶囊的定性检测方法，改进了原有通络化痰胶囊中大黄的定性鉴定方法，增加了：(1)采用‑5℃下低温配置展开剂并进行展开过程；(2)采用乙醚处理样品代替了使用大孔树脂洗脱。与现有技术相比，本发明方法显色结果准确，各主要成分的斑点清晰、重现性好、准确性高，特别是大黄酚、大黄素甲醚的对应斑点实现了有效分离，可作出准确判断；同时大幅节约了样品处理时间，提高了效率，可快速得到检测结果，另一方面还减少了对人体健康的潜在危害，提高了通络化痰胶囊的质量可控性和稳定性。

技术领域

本发明属于药品检测技术领域，特别涉及一种通络化痰胶囊中大黄的薄层色谱检测方法。

背景技术

通络化痰胶囊是在“化痰通络汤”的基础上，加上对脑损伤具有特殊保护作用的熊胆、大黄、天麻、三七、丹参、天竺黄等名贵药材，以现代制药工艺精心研制而成，具有活血通络、化痰熄风的功效。目前，国内外还没有以熊胆单独或复方配制治疗脑血管病的新药或专利，该产品的问世属国内首创。方中大黄是蓼科植物掌叶大黄、唐古特大黄或药用大黄的根茎，功能主治为：泻热毒，破积滞，行瘀血，在通络化痰胶囊方中主要发挥活血行瘀、祛除痰湿等作用，是通络化痰胶囊中的重要成分。

中华人民共和国国家药品监督管理局发布的“国家食品药品监督管理局标准(试行)YBZ00492009“通络化痰胶囊”中规定了大黄的薄层色谱鉴别方法：取本品2g，研细，加甲醇25ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水2ml使溶解，通过D101大孔吸附树脂柱(内径1.7cm，长12cm)，用95％乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取大黄对照药材0.1g，加甲醇20ml超声15分钟，滤过，取滤液10ml，蒸干，残渣加水10ml使溶解，再加盐酸1ml，置水浴中加热回流30分钟，立即冷却，用乙醚分2次提取，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加水2ml溶解，同供试品制备方法相同收集95％乙醇洗脱液，制成对照药材溶液。另取大黄素对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液4μl、对照药材溶液8μl、对照品溶液2μl分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(30-60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)上层液为展开剂，展开8cm，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的五个橙黄色荧光主斑点。在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点，置氨蒸气中熏后，日光下检视，斑点变为红色。

但在实际检验操作过程中发现该薄层色谱检测方法存在供试品及对照药材中大黄酚、大黄素甲醚两种成分所对应的斑点分离度不高的问题，出现念珠状斑点或斑点重合，造成检测结果无法判断或假阴性，不能及时、准确地鉴别出通络化痰胶囊样品中大黄成分，从而导致通络化痰胶囊成品出库滞后，产生巨大的经济损失。

此外标准中大黄薄层色谱鉴别方法使用大孔树脂吸附洗脱工艺处理样品，存在以下几个问题：(1)吸附洗脱过程时间较长，通常需4-6小时，无法快速得到检测结果；(2)样品超声提取后的滤液中含较多复杂成分，难以通过预处理去除，常造成树脂柱出现堵塞现象；(3)树脂中常含有分散剂、致孔剂、惰性溶剂等化学残留，对试验人员身体有一定危害。因此迫切需要一种更准确、高效、安全的大黄检测方法来保证通络化痰胶囊产品的质量。

发明内容

针对上述问题，本发明的目的是提供一种专属性强、分离度好、安全性与准确性高的通络化痰胶囊中大黄的薄层色谱检测方法，以使所得图谱达到清晰度高、分离完全、斑点明显、重现性好的要求。

本发明是通过以下技术方案实现的：

(1)供试品溶液的制备：取通络化痰胶囊成品2g，研细，加甲醇20ml，超声处理15分钟，滤过，取滤液10ml，蒸干，残渣加水10ml使溶解，再加盐酸1ml，置水浴中加热回流30分钟，立即冷却，用乙醚分4次振摇提取，每次20ml、10min，合并乙醚液，蒸干，残渣加乙醇2ml溶解，作为供试品溶液；