[发明专利]一种椴树生根组织培养方法

权利要求书

1.一种椴树生根组织培养方法，其特征在于：按如下步骤进行：

第一步，外植体选取：在3-5月期间，采取当年生的半木质化的嫩茎为材料外植体，采取外植体时在晴天的9-15点时间段进行；

第二步，外植体处理：采来的外植体材料除去不需要的叶片，用洗涤剂清洗2-3分钟后用纱布轻轻擦去茎段上的白毛，再用自来水冲洗3-4小时；洗净后拿到超净工作台上，用无菌水清洗2遍，用75%的酒精清洗30秒，用无菌水清洗2-3遍，用0.1%浓度的升汞浸泡20-25分钟，再用无菌水清洗4-5遍，待用；

第三步，转接：把外植体切成1.5厘米左右长，带侧枝的茎段，在无菌环境下插入椴树专用基础培养基中，插入深度0.5厘米，一瓶3棵；将接种的培养瓶置于温度为23-27℃的洁净环境中，在光照时长为14小时/天、光照强度为2000lux-2500lux条件下培养至其萌发出侧芽；

第四步，生根培育：选择芽体健康，无污染的侧芽或者顶芽，长度为3-4cm长短，放入生根培养基中，在光照强度为2000lux-2500lux，光照时长为14小时/天，培养30天-45天，培养至生根；

第五步，出瓶洗苗：打开瓶口，用镊子将幼苗轻轻夹出，用流动的水下进行清洗，洗净根部附着的培养基后进行移栽。

2.如权利要求1所述的一种椴树生根组织培养方法，其特征在于：所述的椴树专用基础培养基成分按重量组分为：MS培养基为1000份、碳为0.2份、赤霉素为0.5-0.6份混合、萘乙酸为1-1.1份、细胞分裂素为0.5份、琼脂2-3份、蔗糖20-25份、肌醇0.02-0.03份，再加入NaOH调节PH值为5.8。

3.如权利要求1所述的一种椴树生根组织培养方法，其特征在于：所述的生根培养基成分按重量组分为：MS培养基为500份、吲哚丁酸为0.8-1份、琼脂2-2.2份、蔗糖12-15份、萘乙酸为0.4-0.5份、EM益生菌原液0.3-0.4份，再加入NaOH调节PH值为5.8。