[发明专利]一种汞离子的检测方法

权利要求书

1.一种汞离子检测方法，包括如下步骤：

(1)血红素-氧化石墨烯复合物的合成，采用现有技术合成H-GNs，上述血红素-氧化石墨烯复合物简称H-GNs；

(2)将核酸分子发卡序列5’-CACCACAAATTCTCTCTrAGGACAAAAAAAGTGGTG-3’加热到90℃保持5分钟，然后冷却2小时至室温形成核酸分子发卡结构；

(3)DNA酶的形成，在10mM的pH 7.5的Tris-HCl缓冲中将购得的50nM碎片DNA酶序列1和碎片DNA酶序列2与Hg²⁺的待测液和200nM步骤(2)所得核酸分子发卡混合反应，形成DNA酶结构，

上述碎片DNA酶序列1为5’-TTTTGTCAGCGATCCGGAATTGTGGTTGGTGCGGCACCCATGTGAGAGAA-3’，

上述碎片DNA酶序列2为5’-TTTTGTCAGCGATCCGGAACTCCTTCCTCTTCGGCACCCATGTGAGAGAA-3’；

(4)核酸分子发卡环的剪切，将步骤(3)所得溶液和10mM Mg²⁺溶液混合反应15分钟；

(5)H-GNs催化剂的形成，混合步骤(1)所得H-GNs和步骤(4)所得溶液，用Tris-HCl溶液稀释，温育并加入适量NaCl，离心取上清液，该上清液即H-GNs催化剂；

(6)显色和测定，将步骤(5)所得H-GNs催化剂用于催化含3,3',5,5'-四甲基联苯胺和H₂O₂的Tris-HCl缓冲溶液的显色反应，测定其UV-vis吸收光谱，并用标准曲线法计算Hg²⁺浓度，上述3,3',5,5'-四甲基联苯胺简称TMB。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(1)具体为：将20mL含有10mg氧化石墨烯的水超声处理1小时，然后，将20mL的0.5mg mL^-1血红素溶液与上述氧化石墨烯分散体混合并摇动几分钟，然后依次加入200μL氨水溶液和30μL水合肼，在60℃下搅拌3.5小时，离心30分钟，沉淀用超纯水冲洗数次，用超纯水稀释至0.3mg mL^-1备用。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于步骤(5)所用Tris-HCl溶液pH值为7.5，步骤(6)所用Tris-HCl溶液pH值为5。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于步骤(6)测定的UV-vis吸收光谱是500至800nm范围内的。