[发明专利]一种确定污水处理好氧反硝化菌最适保存温度的方法

权利要求书

1.一种确定好氧反硝化菌最适保存温度的方法，其特征在于，所述方法是利用流式细胞术测定不同温度保存的好氧反硝化菌的细胞活性状态，将最接近好氧反硝化菌在中试运行中的细胞活性状态的保存温度确定为最适保存温度；所述好氧反硝化菌细胞活性状态的测定包括活细胞、凋亡早期细胞、凋亡晚期细胞和死细胞的含量测定；

所述利用流式细胞术确认最适温度的方法包括：

(1)好氧反硝化菌测试样液的制备：用缓冲液稀释好氧反硝化菌样品，混合均匀后过滤取沉淀，离心，留用上清液，使用预冷缓冲液吹洗细胞，重复离心和清洗两次，再取上清液作为样品，使用适量10x Annexin V Binding Buffer混匀制得；

(2)置于流式细胞仪测定各样液的细胞活性状态；

所述流式细胞仪测定各样液的细胞活性状态是在对照FITC Annexin V组加入0.5μlPI染色剂，对照PI组加入0.5μl FITC Annexin V，检测组加入0.5μl FITC Annexin V和0.5μl PI，混匀后室温下避光孵育10～20min，之后于流式细胞仪上机检测。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述缓冲液的pH为7.3～7.6。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述缓冲液包括磷酸盐缓冲液。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述缓冲液包括(8～28)％v/v磷酸二氢钠和(72～92)％v/v磷酸氢二钠。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述缓冲液与好氧反硝化菌的稀释体积比为4～10：1。

6.根据权利要求1～5任一所述的方法，其特征在于，所述过滤是利用孔径6～15μm的尼龙膜。

7.一种快速启动好氧反硝化菌的方法，其特征在于，是利用权利要求1～5任一所述方法确定最适保存温度，在最适保存温度下，将培养成熟的好氧反硝化菌置于保存基质中进行保存，活性恢复后即可启动好氧反硝化菌工程。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述保存基质的COD浓度为100～150mg/L,NH₄⁺-N浓度为27.5～38.5mg/L，NO₃^--N浓度为4.5～8.0mg/L。

9.一种污水处理的方法，其特征在于，是利用权利要求7或8所述方法快速启动好氧反硝化菌工程。