[发明专利]功能化介孔硅基肿瘤靶向运输控释系统及其制备方法

权利要求书

1.一种制备功能化介孔硅基肿瘤靶向运输控释系统的方法，其特征在于：包括如下步骤：

S1:巯基功能化介孔硅纳米粒子MSN-SH的制备

准确称取NaOH加入到去离子水中，再加入十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)后超声溶解，剧烈搅拌升温至60-80℃，正硅酸四乙酯(TEOS)和3-巯基丙基三甲氧基硅烷(MPTMS)缓慢滴加至上述溶液中，反应在80℃下剧烈搅拌2h；待冷却至室温后，以9500r/min×8min离心收集得到白色固体物，分别用甲醇和去离子水超声清洗数次，产物冻干后，即得含有表面活性剂的介孔硅纳米粒子CTAB@MSN-SH；去除介孔硅纳米粒子的CTAB后，产物冻干得到介孔硅纳米粒子MSN-SH；

S2:双硫功能化的介孔硅纳米粒子MSN-SS-NH₂的制备

准确称取MSN-SH，在甲醇中超声分散均匀；然后加入S-(2-氨乙巯基)-2-巯基吡啶盐酸盐，在室温下反应；将产物离心，并用甲醇和去离子水超声清洗数次，冻干后得到双硫功能化的介孔硅纳米粒子MSN-SS-NH₂；

S3:腙键功能化的介孔硅纳米粒子MSN-SS-N＝C-ph的制备

将MSN-SS-NH₂分散于pH＝8.0的PBS缓冲溶液中，超声使其分散均匀，然后加入苯甲醛，室温下反应24h；将产物离心收集，用pH＝8.0的PBS缓冲溶液超声清洗数次，冻干后得到腙键功能化的介孔硅纳米粒子MSN-SS-N＝C-ph；

S4:载体粒子X@MSN-SS-N＝C/B-CD-HA的制备

称取MSN-SS-N＝C-ph分散于pH＝8.0的PBS缓冲溶液中，超声分散均匀，然后再加入药物X，在室温下避光剧烈搅拌；最后加入透明质酸嫁接的β-环糊精，在室温下避光反应12-48小时，反应结束后用pH＝8.0的PBS缓冲溶液和去离子水清洗数遍，冻干后即得X@MSN-SS-N＝C/B-CD-HA；

所述透明质酸嫁接β-环糊精HA-B-CD的制备包括两个步骤A和B：

步骤A：6-氨基化的β-环糊精β-CD-NH₂的制备

制备β-CD-NH₂分两步，首先合成6-OTs化的β-环糊精再合成6-氨基化的β-环糊精；

合成6-OTs化的β-环糊精的步骤如下：将β-CD悬浮于浓度为0.4mol/LNaOH溶液中，在0℃冰水浴下缓慢加入对甲苯磺酰氯(TsCl)以确保取代发生在6号位，低温搅拌45min后将沉淀过滤两次，滤液用稀盐酸调节pH至5-6.5，有大量白色沉淀析出，4℃下保存过夜，次日抽滤将沉淀用80℃去离子水重结晶再抽滤，产物在20-80℃下真空干燥12-48h；

合成6-氨基化的β-环糊精的步骤如下：将6-OTs化的β-环糊精溶解在重蒸无水乙二胺中，在60-90℃下通入N₂回流24-96h，冷却至室温，用丙酮沉淀一天后，用有机漏斗过滤再用丙酮沉淀重复2次，共沉淀三次后真空干燥得到β-CD-NH₂；

步骤B：透明质酸嫁接β-环糊精HA-B-CD的制备

称取HA溶于去离子水中，水合过夜，加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(EDC·HCl)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)于冰浴4℃活化羧基，过夜后调节pH至4.0-6.0，然后加入β-CD-NH₂于室温下反应24-72h，反应结束后用MWCO＝3.5KDa透析袋透析3-5天，期间每6h换一次水，冻干后即得HA-B-CD。

2.根据权利要求1所述的制备功能化介孔硅基肿瘤靶向运输控释系统的方法，其特征在于：步骤S1中去除介孔硅纳米粒子的CTAB采用甲醇酸性条件萃取法:称取CTAB@MSN-SH加入无水甲醇中，震荡、超声分散均匀后，加入质量分数37％的浓HCl，在20-80℃条件下回流反应12-96h，经过离心用甲醇和去离子水清洗数次，产物冻干得到介孔硅纳米粒子MSN-SH。