[发明专利]用于免疫治疗的RNA制剂

说明书

本发明涉及用于免疫治疗的RNA制剂，属于免疫治疗领域，具体地，属于肿瘤免疫治疗领域。本发明提供了用于在全身性施用后将RNA递送至脾中的抗原呈递细胞(例如树突细胞(DC))的药物制剂。特别地，本文所述的制剂使得能够在全身性施用编码抗原的RNA后诱导免疫应答。

本申请是申请日为2013年03月25日、申请号为201380016262.0、发明名称为“用于免疫治疗的RNA制剂”的中国专利申请的分案申请。

技术领域

本发明属于免疫治疗领域，具体属于肿瘤免疫治疗领域。本发明涉及提供用于在全身性施用后将RNA高选择性地递送至脾的抗原呈递细胞(例如树突细胞(DC))的药物制剂。特别地，本文所述的制剂使得能够在全身性施用编码抗原的RNA后诱导免疫应答。

背景技术

核酸(如DNA、siRNA或RNA)用于在患者中进行多种治疗性干预是令人感兴趣的。在肿瘤治疗中相对新的免疫学方法是基于通过编码RNA在抗原呈递细胞(APC)中表达肿瘤抗原，以诱导针对肿瘤的T细胞应答(Weide，B.等，(2008)Journal of Immunotherapy31(2)：180-188；Weide，B.等，(2009)Journal of Immunotherapy32(5)：498-507；Kreiter，S.等，(2010)Cancer Res70(22)：9031-9040；Kuhn，A.N.等，(2010)Gene Ther17(8)：961-971)。用于此种干预的靶细胞是存在于例如淋巴结(LN)或脾中的树突细胞(DC)。

为了提供DC对RNA的充分摄取，将RNA局部施用于淋巴结已被证明是成功的。然而，这样的局部施用需要医生的专业技能。因此，需要能够进行全身性施用的RNA制剂，例如，静脉内(i.v.)施用、皮下(s.c.)施用、皮内(i.d.)施用或通过吸入施用。从文献中已知多种用于全身性施用核酸的方法。在非病毒基因的转移中，使用阳离子脂质体来诱导DNA/RNA缩合，并且促进细胞摄取。阳离子脂质体通常由阳离子脂质(如DOTAP)和一种或更多种辅助脂质(如DOPE)组成。所谓的“脂质体复合物(lipoplex)”可由阳离子(带正电的)脂质体和阴离子(带负电的)核酸形成。在最简单的情况下，脂质体复合物通过某种混合方案使核酸与脂质体混合来自发形成，但是也可应用多种其他方案。带正电的脂质体与带负电的核酸之间的静电相互作用是形成脂质体复合物的驱动力。除了脂质组分以外，阳离子部分和阴离子部分之间的电荷比也对有效的缩合和转染起重要作用。一般来说，脂质体复合物的过量正电荷被认为是有效转染所必需的(Templeton，N.S.等，(1997)Nature Biotechnology15(7)：647-652；Zhdanov，R.I.等，(2002)Bioelectrochemistry58(1)：53-64；Templeton，N.S.(2003)Current Medicinal Chemistry10(14)：1279-1287)。大多数天然膜带负电，因此，带正电的脂质体复合物与带负电的生物膜之间的静电相互吸引作用可能在细胞结合和脂质体复合物摄取方面起作用。被视为转染的最优+/-比率的典型范围是2至4。如果具有较低的过量正电荷，则转染效率大幅下降至几乎为零。遗憾的是，由于已报道带正电的脂质体和脂质体复合物具有升高的毒性，这对于这样的制备物作为药品的应用是一个问题。