[发明专利]猪脂肪组织特异性启动子及其应用

说明书

本发明公开了猪脂肪组织特异性启动子及其应用。本发明所提供的特异DNA分子，其核苷酸序列如序列表中序列2自5’末端起第2044至3090位所示或如序列表中序列2所示。实验证明，本发明提供的特异DNA分子可以在猪脂肪组织中特异启动目的基因(如双荧光素酶报告基因)的表达，说明该特异DNA分子是一个脂肪组织特异性启动子。本发明具有重要的应用价值。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及猪脂肪组织特异性启动子及其应用。

背景技术

启动子是位于基因起始密码子(ATG)上游的一段DNA序列，能够与RNA聚合酶结合并启动基因的转录，相当于基因转录的“开关”。启动子主要包含两个区域：核心启动区和非核心启动区。核心启动区形成普遍性转录结构，通常由一些短的保守序列(如转录起始位点、TATA-box、CAAT-box等)组成。这些序列的结构特征决定着启动子同RNA聚合酶的识别、结合及起始转录过程。非核心启动区包括近端调控区和远端调控区，往往存在一些特异性的转录因子结合的位点，调控基因转录的时间和空间特异性。根据启动子的转录模式不同将其分为组成型、诱导型和组织特异性启动子三类。组成型启动子能在不同类型的细胞及细胞发育的不同阶段，持续高效地驱动基因转录，并且转录活性相对恒定，受组成型启动子驱动的基因往往被称作管家基因(housekeeping gene)。诱导型启动子需要诱导信号刺激，才能启动基因的转录，当诱导信号消失后，诱导型启动子的活性降低或消失，诱导型启动子在植物中更为常见，它所驱动的基因通常在植物生长发育调节和不良环境应对过程中发挥重要作用。组织特异型启动子是仅在某些特定类型的细胞(组织)或细胞(组织)发育的某一特定阶段高效地转录，其含有决定启动子的特异性的顺式调控元件，要与该组织特异性存在的转录因子相结合，才表现出启动子活性，组织特异性启动子驱动的基因往往与该种类型的细胞(组织)功能密切相关。由于组织特异性启动子能够驱动基因仅在特定类型的细胞(组织)中表达，在构建组织特异性基因修饰动物中具有重要的应用，一方面可以通过Cre-LoxP重组酶系统在某种特定类型的细胞(组织)中敲除某一功能基因，研究其对该组织发育和生理功能的影响；另一方面，可以驱动外源基因在某一特定类型的细胞(组织)中转录、表达，而对其他组织、器官不产生(或少产生)影响，目前应用最为成为成功的例子是利用乳腺特异性启动子驱动编码药物蛋白的基因，特异性表达于牛乳中，即乳腺生物反应器。

脂肪沉积性状是猪最重要的经济性状之一，它直接影响着猪的生产效率、猪肉品质、繁殖性能等诸多方面。目前，由于缺乏具有育种价值的功能基因和调控元件，所以极大的限制了家猪分子育种的发展。构建基因修饰(转基因或基因敲除)猪是验证基因育种价值的重要研究手段。猪脂肪组织特异性启动子是构建脂肪组织特异性基因修饰猪的必要条件条件，使深入研究猪脂肪组织代谢调控成为可能。获得猪脂肪组织特异性启动子不仅能够推动家猪分子育种的研究，还能用于构建脂类代谢异常的疾病模型猪，推动相关医学、药学的研究。

发明内容

本发明的目的是启动目的基因在脂肪组织中表达。

本发明首先保护一种特异DNA分子，其可包括区段A；所述区段A的核苷酸序列可如序列表中序列2自5’末端起第2044至3090位所示。

所述特异DNA分子具体可由所述区段A组成。

所述特异DNA分子还可包括区段B；所述区段B位于所述区段A的上游；所述区段B的核苷酸序列可如序列表中序列2自5’末端起第1至2043位所示。

所述特异DNA分子具体可由所述区段A和所述区段B组成。

所述特异DNA分子具体可为b1)或b2)或b3)或b4)所示的DNA分子：

b1)核苷酸序列为序列表中序列2自5’末端起第2044至3090位所示的DNA分子；

b2)核苷酸序列为序列表中序列2所示的DNA分子；