[发明专利]特异性结合CD19的全人源化抗体及应用

说明书

本发明涉及特异性结合CD19的全人源化抗体及应用。该抗体至少具有重链CDR1、重链CDR2、重链CDR3、轻链CDR1、轻链CDR2、轻链CDR3之一。该抗体可用于制备细胞或偶联物、诊断试剂盒、药物或药物组合物；该核酸用于制备特异性结合CD19的全人源化抗体、药物或药物组合物；该细胞或偶联物用于制备药物或药物组合物；该药物或药物组合物具有针对CD19阳性肿瘤的抗肿瘤作用。本发明通过噬菌体展示技术筛选出抗CD19的全人源化抗体，该抗体特异性强，亲和力高，能与CD19阳性细胞结合，且不会与现有抗体FMC63形成竞争结合关系，具有抗肿瘤应用前景。

技术领域

本发明涉及一种特异性结合CD19的全人源化抗体及应用，属于生物技术领域。

背景技术

据发明人所知，CD19是特异性表达于人正常及恶变B细胞表面的跨膜蛋白，分子量约95kd。在B细胞谱系发育的各个阶段均高表达CD19，但完全成熟的浆细胞丢失CD19的表达，是B细胞的重要标记。CD19在B细胞表面与CD21及CD81形成多分子复合体。在获得激活信号后，位于CD19细胞内结构域上的6个酪氨酸残基发生磷酸化，招募下游信号分子，放大BCR的活化信号。CD19基因敲除小鼠B细胞活化明显减弱，同时对大多数抗原的抗体应答都受到显著抑制。因此，CD19作为B细胞受体的共受体(co-receptor)发挥作用，通过降低BCR激活所需的信号阈值，调控B细胞的发育、增殖和分化^[1]。

CD19在B细胞上的广泛表达使其成为B细胞恶性病变的重要治疗靶点^[2]。在多种类型的B细胞白血病(包括急性B淋巴细胞白血病，慢性B淋巴细胞白血病)、B细胞淋巴瘤(包括霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤和弥漫性大B细胞淋巴瘤)的治疗中，CD19抗体、双特异性抗体和抗体衍生物的抗肿瘤临床前试验和临床实验已经广泛开展；尤其是由CD19抗体衍生的嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cell,CAR-T)治疗方法^[3]，已经有两项获得FDA批准上市^[4,5]，分别用于治疗急性B淋巴细胞白血病和B淋巴瘤；其识别CD19的抗体为FMC63，是一种基于小鼠单克隆抗体的人源化抗体^[6]。故筛选新型CD19全人源化抗体，构建嵌合抗原受体T细胞用于B细胞恶性病变的治疗，具有重要的临床应用价值。

经检索发现，申请号201711157376.3，申请公布号CN107827991A的中国发明专利申请，公开一种靶向CD19的嵌合抗原受体T细胞及其应用。以该技术方案为代表的现有技术中已经存在了一些抗CD19抗体。发明人课题组经系统地试验研究后得出了不同于现有技术的特异性结合CD19的全人源化抗体。

发明内容

本发明的主要目的是：针对现有技术存在的问题，提供一种特异性结合CD19的全人源化抗体，能与CD19阳性细胞结合。

本发明解决其技术问题的技术方案如下：

一种特异性结合CD19的全人源化抗体，所述抗体包括重链和轻链；其特征是，所述抗体至少具有以下技术特征之一：

i、所述重链包括重链CDR1，即SEQ ID NO:2所示氨基酸序列中的氨基酸残基26-33；

ii、所述重链包括重链CDR2，即SEQ ID NO:2所示氨基酸序列中的氨基酸残基50-59；

iii、所述重链包括重链CDR3，即SEQ ID NO:2所示氨基酸序列中的氨基酸残基100-103；

iv、所述轻链包括轻链CDR1，即SEQ ID NO:2所示氨基酸序列中的氨基酸残基161-165；

v、所述轻链包括轻链CDR2，即SEQ ID NO:2所示氨基酸序列中的氨基酸残基183-186；

vi、所述轻链包括轻链CDR3，即SEQ ID NO:2所示氨基酸序列中的氨基酸残基224-229。