[发明专利]一种改进的Trizol提取DNA方法在审
申请号: | 201811143794.1 | 申请日: | 2018-09-29 |
公开(公告)号: | CN109295047A | 公开(公告)日: | 2019-02-01 |
发明(设计)人: | 柏锦程;张振 | 申请(专利权)人: | 江苏齐耀生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 南京利丰知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32256 | 代理人: | 任立 |
地址: | 212400 江苏省镇江市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
摘要: | |||
搜索关键词: | 提取DNA 磁珠 改进 解吸 氢氧化钠溶液 裂解缓冲液 清洗缓冲液 真空干燥箱 磁分离架 提取效率 离心机 纯乙醇 缓冲液 提取量 震荡机 节约 氯仿 去除 | ||
本发明专利公布了一种改进的Trizol提取DNA方法,所需试剂和材料包括:磁珠、Trizol、氯仿、纯乙醇、氢氧化钠溶液、裂解缓冲液、清洗缓冲液、解吸缓冲液,所需设备包括:EP管、真空干燥箱、磁分离架、震荡机、离心机,DNA提取方法包括:去除水相、DNA吸附磁珠、DNA解吸磁珠。本发明对传统Trizol法进行改进,改进后的Trizol法与普通Trizol法相比,操作简便、提取DNA纯度高、节约时间、提取浓度大,一种操作简便、节约时间、提取效率高、提取质量好、提取量大、提取范围广的改进的Trizol提取DNA方法。
技术领域
本发明涉及DNA提取领域,尤其涉及改进的Trizol提取DNA方法。
背景技术
随着现代科技的不断发展,DNA的相关技术也在不断进步,DNA的许多研究已不仅仅局限于生物科技和医疗领域,DNA的检查早已在法医学中得到应用,并成为法庭审判的主要证据。
在现在的案件侦破中,由于科技的发展,犯案手段也越来越隐匿,加上对证据的要求越来越严谨,使得侦破难度加大,但人体的生物特征不会轻易改变,因此从犯罪现场取得DNA样本,并进行DNA提取,以作为指证罪犯的证据,已成为现在案件侦破中必不可少的一部分,且对犯人进行DNA提取,并建立DNA库,可快速发现有前科的嫌疑人,加快案件的侦破。
DNA不仅在案件侦破过程中发挥着重要作用,在生物科技和医疗领域亦有着不可替代的地位,通过对DNA进行分析和研究,可深入探索生物体的各项性状,发现生物的各项特征,甚至一些人们以前未发现的生物本能,对生物的诸多行为做出解释并加以利用,可提前发现会引起不正常病变的DNA并提前做出应对措施,甚至可利用其他生物的DNA来弥补人体缺陷,使得医疗水平得到提高,人们身体健康得到保障,能够得到更加健康的生活。
DNA在生物科技、医疗以及案件侦破中都有着重要作用,但无论是在何种领域发挥着怎样的作用,都必须要经过提取才能进行后续工作,因此,DNA的提取与分离就成为了一项重要环节,目前的DNA提取方法主要分为物理方法、化学方法以及生物方法,但这些方法的传统措施已逐渐不能满足DNA在相关领域的应用需要,传统方法已逐渐被后来出现的磁珠法所替代,磁珠法是利用磁珠在一定条件下对DNA具有极强的吸附能力,但在一定条件下又会发生强烈的解吸的特点,先改变条件使得DNA吸附在磁珠表面,然后再转移磁珠并改变条件是DNA与磁珠发生强烈的解吸,进而获得DNA,但对于磁珠法的具体措施仍未出现统一认可的方案,仍需不断完善。
发明内容
本发明的目的是解决DNA提取过程中提取步骤复杂、提取过程花费时间长、提取的DNA质量差且提取量少的问题,提供一种操作简便、节约时间、提取效率高、提取质量好、提取量大、提取范围广的改进的Trizol提取DNA方法。
本发明所采用的技术方案:一种改进的Trizol提取DNA方法,所需试剂和材料包括:磁珠、Trizol、氯仿、纯乙醇、氢氧化钠溶液、裂解缓冲液、清洗缓冲液、解吸缓冲液,所需设备包括:EP管、真空干燥箱、磁分离架、震荡机、离心机,所述氢氧化钠溶液浓度为3mol/L;所述解吸缓冲液根据DNA的不同进行制备,进而营造出利于DNA解吸的环境;所述真空干燥箱用于对磁珠进行干燥处理,去除其表面液体;所述磁分离架用于进行磁珠与溶液的分离;所述震荡机为漩涡震荡机,用于进行溶液震荡,以便充分混合与反应;所述离心机主要进行溶液的离心处理。
本发明一种改进的Trizol提取DNA方法具体实施如下:
(一)去除水相:将待提取DNA的样本放入EP管,并将Trizol加入EP管中,将EP管放入震荡机充分震荡8分钟,使溶液充分混合,然后加入氯仿再震荡20s,之后室温下静置5分钟,再将EP管放入离心机中,在1300倍重力、5℃的条件下进行10分钟离心,离心后溶液出现分层,分层的上层为水相层,将水相层去除,保留剩余层;
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于江苏齐耀生物科技有限公司,未经江苏齐耀生物科技有限公司许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201811143794.1/2.html,转载请声明来源钻瓜专利网。