[发明专利]促进枯草芽孢杆菌发酵生产N-乙酰神经氨酸的方法有效
| 申请号： | 201811125666.4 | 申请日： | 2018-09-26 |
| 公开（公告）号： | CN109161576B | 公开（公告）日： | 2020-08-07 |
| 发明（设计）人： | 朱薇薇;陈祥松;李翔宇;吴金勇;袁丽霞;姚建铭 | 申请（专利权）人： | 武汉中科光谷绿色生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12P39/00 | 分类号： | C12P39/00;C12P19/26;C12R1/125;C12R1/645 |
| 代理公司： | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人： | 贾颜维 |
| 地址： | 430000 湖北省武汉市东湖新技*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 促进 枯草 芽孢 杆菌 发酵 生产 乙酰 神经 氨酸 方法 | ||
1.一种促进枯草芽孢杆菌发酵生产N-乙酰神经氨酸的方法，其特征在于，将能够发酵生产N-乙酰神经氨酸的枯草芽孢杆菌接种至发酵培养基中进行发酵培养，在发酵培养过程中加入裂殖壶菌的菌粉；所述能够发酵生产N-乙酰神经氨酸的枯草芽孢杆菌是通过将UDP-N-乙酰氨基葡萄糖差向异构酶基因、N-乙酰神经氨酸合成酶基因和6-磷酸氨基葡萄糖合成酶基因导入枯草芽孢杆菌中进行外源表达而构建得到的。
2.根据权利要求1所述的促进枯草芽孢杆菌发酵生产N-乙酰神经氨酸的方法，其特征在于，所述发酵培养基包括以下成分：甘油10-30g/L；胰蛋白胨2-6g/L；磷酸二氢钾4-8g/L；硫酸铵2-4g/L；七水硫酸镁0.5-2g/L；IPTG1-3mmol/L。
3.根据权利要求1所述的促进枯草芽孢杆菌发酵生产N-乙酰神经氨酸的方法，其特征在于，在发酵培养的第0-72h之间加入所述裂殖壶菌的菌粉。
4.根据权利要求1所述的促进枯草芽孢杆菌发酵生产N-乙酰神经氨酸的方法，其特征在于，所述裂殖壶菌的菌粉的添加量为每1L所述发酵培养基中加入1-4g。
5.根据权利要求1所述的促进枯草芽孢杆菌发酵生产N-乙酰神经氨酸的方法，其特征在于，在发酵培养的第20-24h之间加入所述裂殖壶菌的菌粉，添加量为2-2.5g/L发酵培养基。
6.根据权利要求1所述的促进枯草芽孢杆菌发酵生产N-乙酰神经氨酸的方法，其特征在于，所述裂殖壶菌的菌粉是将裂殖壶菌依次使用液体种子培养基和液体发酵培养基培养得到裂殖壶菌菌体，将所述裂殖壶菌菌体离心、干燥得到。
7.根据权利要求6所述的促进枯草芽孢杆菌发酵生产N-乙酰神经氨酸的方法，其特征在于，所述液体种子培养基包含以下成分：葡萄糖30-50g/L、谷氨酸钠20-40g/L、酵母浸膏4-8g/L、氯化钠15-25g/L、磷酸二氢钾4-8g/L、硫酸镁6-10g/L。
8.根据权利要求6所述的促进枯草芽孢杆菌发酵生产N-乙酰神经氨酸的方法，其特征在于，所述液体发酵培养基包含以下成分：葡萄糖50-70g/L、谷氨酸钠20-40g/L、酵母浸膏4-8g/L、氯化钠15-25g/L、磷酸二氢钾4-8g/L、硫酸镁6-10g/L。
9.根据权利要求1所述的促进枯草芽孢杆菌发酵生产N-乙酰神经氨酸的方法，其特征在于，所述裂殖壶菌的保藏编号为CCTCC NO：M 2012494。
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