[发明专利]一种茶树氮吸收能力的早期无损鉴定方法

权利要求书

1.一种茶树氮吸收能力的早期无损鉴定方法，其特征在于包括以下步骤：

1）茶树插穗枝条选择与扦插、根系的选择与前处理：选择龙井43作为高氮高效茶树品种对照，乌牛早作为低氮高效茶树对照品种，将待鉴定品种与对照品种分别进行穗条留养、扦插，待扦插苗长出2-4 cm新鲜嫩根后，将待测根系剪下，备用；

步骤1）中具体包括：

a．茶树插穗枝条选择与沙培扦插：将茶树不采春茶，待鉴定品种与对照品种分别进行穗条留养，在3月初，待茶树枝条变硬之后，将茎段仍为绿色的茶树枝条剪下，然后，将枝条剪成带有一芽一叶的2.5-3.5 cm 长的插穗；沙培采用的沙子经过淋洗与充分晾晒，在田间进行铺设，厚度15-25cm，选择阴雨天，将剪好的插穗扦插到沙子中，扦插完毕后，进行浇灌，保持田间持水量的78-83%，搭建遮阳架，用两层遮阳网进行遮阳；

b．非损伤性微测根系的选择与前处理：待扦插苗长出根系后，小心从沙子中取出根系，用纯水将根系表面的沙子洗净，在茶树营养液中培养至长出2-4 cm新鲜嫩根后，将待测根系剪下，放在测试液中进行离子平衡稳定5-15 min；

2）非损伤性微测根系的固定：将待测根系固定在测试盘底部；

3）测试液选择：采用0.08-0.12 mM CaCl₂, 0.25-0.35 mM 吗啉乙磺酸MES 和不同浓度的NH₄NO₃混合作为测试液，用0.5 mM三羟甲基氨基甲烷Tris溶液将测试液pH调节至6.3-6.8，NH₄NO₃浓度测试设计0.1，0.5，1，5，8 mM浓度梯度，涵盖茶树低氮，中氮和高氮的浓度梯度；

4）非损伤性微测系统校正：每次测试或换探针前，采用三点法对非损伤性微测系统进行校正，选择NH₄NO₃浓度为0.1，1，8 mM；

5）根系表面NH₄⁺和NO₃^-离子流速测定：在成熟区选择根系表面光滑的位点进行测试，每个位点测试2-4 min,一条根系选择3个位点，流速测定后取平均值作为一条根的流速值，每个试验选取6条根作为生物学重复；

6）茶树氮吸收能力评价：根据不同浓度下NH₄⁺和NO₃^-离子流速，计算总氮流速，采用米氏动力学方程求出总氮的吸收动力学参数，将鉴定品种和对照品种的吸收动力学参数进行比对，评价鉴定品种的氮吸收能力；

7）扦插苗回植。

2.如权利要求1所述的一种茶树氮吸收能力的早期无损鉴定方法，其特征在于步骤2）中具体包括：将待测根系一端用两条狭长的滤纸夹住，放入测试盘中，滤纸两端分别用1个1×1 cm的平底小方石固定，使待测根系不至于紧贴于测试盘底部，防止测试过程中探针尖端破损。

3.如权利要求1所述的一种茶树氮吸收能力的早期无损鉴定方法，其特征在于步骤3）中：采用0.1 mM CaCl₂, 0.3 mM 吗啉乙磺酸MES 和不同浓度的NH₄NO₃作为测试液，用0.5mM三羟甲基氨基甲烷Tris溶液将测试液pH调节至6.5。

4.如权利要求1所述的一种茶树氮吸收能力的早期无损鉴定方法，其特征在于所述的茶树营养液由于以下物质混合制成： 1 mM NH₄NO₃、0.07 mM KH₂PO₄、0.3 mM K₂SO₄、0.67 mMMgSO₄·7H₂O、0.53 mM CaCl_2·2H₂O、 0.035 mM Al₂(SO₄)₃·18H₂O、7μM H₃BO₄ 、1μM MnSO₄·H₂O、0.67μM ZnSO₄·7H₂O 、0.13μM CuSO₄·5H₂O、0.047μM (NH₄)₆Mo₇O₂₄·4H₂O、4.2μM EDTA-Fe ，余量为纯水，用0.01 mM NaOH调pH至5.0。