[发明专利]一种硅纳米粒子/金纳米簇比率荧光探针的合成及其对利福平比率荧光检测的应用

权利要求书

1.一种硅纳米粒子/金纳米簇比率荧光探针的制备方法，其特征在于，由以下步骤组成：

(1)采用水热还原法制备氨基保护的硅纳米粒子：(a)将水溶性硅源、还原剂和水混合，得到初混物；(b)将所述步骤(a)中初混物在室温下搅拌10～20min，得到反应前驱体；(c)将所述步骤(b)中的反应前驱体放入体积为20mL的特氟龙内衬的反应釜中，于220～240℃下水热反应1～3h，得到氨基保护的硅纳米粒子；

(2)采用搅拌还原法制备羧基保护的金纳米簇：(a)将氯金酸HAuCl₄·3H₂O、巯基十一酸MUA及水混合，得到初混物；(b)采用pH调节剂调节所述步骤(a)中初混物的pH值为10～12，得到反应前驱体；(c)将所述步骤(b)中的反应前驱体在室温下进行搅拌，反应4～7h，得到羧基保护的金纳米簇；

(3)将所述步骤(1)和(2)中的硅纳米粒子与金纳米簇进行自组装，合成硅纳米粒子/金纳米簇比率荧光探针：(a)将硅纳米粒子和金纳米簇在缓冲溶液中混合，得到初混物；(b)在室温下将所述步骤(a)中初混物混匀并孵育0.5～2h，得到硅纳米粒子/金纳米簇比率荧光探针；

所述步骤(1)中还原剂与水溶性硅源的摩尔比为1:(50～150)，其中还原剂的物质的量浓度为100mM；所述步骤(2)中HAuCl₄·3H₂O与MUA的摩尔比为1:(4～8)，最终初混物中HAuCl₄·3H₂O的物质的量的浓度为500μM；所述步骤(3)中硅纳米粒子与金纳米簇的质量比为200:1，其中硅纳米粒子质量浓度为4mg/mL；金纳米簇质量浓度为20μg/mL。

2.据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中水溶性硅源包括3-氨丙基三乙氧基硅烷APTES或3-氨丙基三甲氧基硅烷APTMS；还原剂包括抗坏血酸AA或柠檬酸钠。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中调节初混物pH值所采用的pH调节剂包括氢氧化钠溶液或氢氧化钾溶液；pH调节剂的浓度为1.0～1.2M。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中缓冲溶液包括HEPES、Tris-HCl以及PBS缓冲溶液；缓冲溶液pH值范围为7.0～8.0。

5.权利要求1～4任一项所述制备方法制备得到的硅纳米粒子/金纳米簇比率荧光探针，包括硅纳米粒子和螯合于硅纳米粒子表面的金纳米簇。

6.根据权利要求5所述的硅纳米粒子/金纳米簇比率荧光探针，其特征在于，所述硅纳米粒子/金纳米簇比率荧光探针，得到最强激发波长为300～310nm，最强发射波长在440～445nm以及610～615nm，具有比率荧光特征。

7.权利要求5或6所述的硅纳米粒子/金纳米簇比率荧光探针在比率荧光检测利福平中的应用。