[发明专利]一种新型荧光探针的合成及在检测半胱氨酸中的应用

说明书

一种新型荧光探针，它具有如下结构式。经实验证明，该新型荧光探针对半胱氨酸具有较好的选择性，可以定量检测生物体内外的半胱氨酸。本发明公开了该新型荧光探针的合成方法。

技术领域

本发明属于生物化学技术领域，具体涉及一种新型荧光探针的制备方法、活性评价及其在检测半胱氨酸中的应用。

背景技术

硫是植物生长发育的重要营养元素之一，而半胱氨酸(Cys)是生物体内组成蛋白质的氨基酸中唯一含有巯基(-SH)的氨基酸。半胱氨酸具有重要的生理功能，由于其功能涉及微量元素代谢、重金属解毒、消除自由基等许多生理调控过程，故体内半胱氨酸代谢失调会导致一系列免疫系统功能性疾病。通过监测生物体中半胱氨酸浓度，可实现某些疾病的前期诊断。因此，研发一种可以快速、灵敏、选择性高的检测半胱氨酸的方法具有重要的意义。

目前，测定Cys的方法主要有电化学法、高效液相色谱法、共振散射光谱法、毛细管区带电泳法、分光光度法和荧光光谱法等。其中，荧光光谱法以其方便快捷、反应迅速、成本较低等优势脱颖而出。荧光探针与Cys作用后，发生荧光变化，如荧光强度或者发射波长的改变等，实现其分析测定。

因此，本发明设计合成了一种新型荧光探针，通过体内、体外测定半胱氨酸，研究其在检测半胱氨酸活性的潜在价值。

发明内容

本发明涉及一种新型荧光探针的合成及在检测半胱氨酸中的应用。

本发明的技术方案如下：

一种新型的荧光探针，中文名：反式乙-3-(7-(丙烯酰氧基)-2-氧-2氢苯并吡喃-3-基)丙烯酸酯。具体化学结构如下：

该新型荧光探针的合成方法，其特征由如下步骤组成：

步骤1称取适量化合物1、2倒入容积一定的反应器，并溶解在一定体积的溶剂中，加入化合物2、哌啶并在特定的反应温度下反应，直至原料完全消耗，处理获得化合物3。

步骤2称取适量化合物3、三乙胺倒入含有一定溶剂的容器中，置于某温度下，缓慢加入特定量的丙烯酰氯，反应直至原料消耗完全，处理获得化合物4，即荧光探针。

本发明涉及合成的一种新型荧光探针，在体内、外测定半胱氨酸具有较好的效果，因此本发明的荧光探针可定量检测半胱氨酸。

附图说明

图1、本发明荧光探针的紫外吸收谱图

图2、本发明荧光探针的荧光光谱图

图3、本发明荧光探针对半胱氨酸等氨基酸选择性的柱形图

图4、本发明荧光探针关于半胱氨酸等生物巯基物质干扰性的柱形图

图5、本发明荧光探针在细胞内检测半胱氨酸的荧光成像

具体实施方式

通过以下实例详细介绍本发明，但本发明的保护范围并不受任何实施实例的限制。

实施实例一：荧光探针的合成与制备