[发明专利]甜菊糖苷的鉴定方法

权利要求书

1.甜菊糖苷的鉴定方法，其特征在于：它包括如下内容：

(1)将待测甜菊糖苷经过一级和二级质谱分析；

(2)一级质谱分析中，至少获得待测甜菊糖苷的分子量和阴离子[M-H]^-的质荷比；

(3)一级质谱分析中，通过如下公式计算待测甜菊糖苷中葡萄糖基的个数：([M-H]^-质荷比-甜叶醇离子质荷比)/葡萄糖基质荷比；

(4)二级质谱中，分析质荷比位于甜叶醇离子到[M-H]^-之间的二级离子片断；

(5)二级质谱分析中，对C19位的葡萄糖基数量进行分析；该数量的计算有两种情况：(a)在给定条件下的二级质谱中若不存在明显的最高丰度的离子片断峰，则该数量为0；(b)在给定条件下的二级质谱中存在明显的最高丰度的离子片断峰，则该数量为A类离子数量加1；其中，A类离子的质荷比在最高丰度的特征离子与[M-H]^-之间，且其质荷比＝最高丰度的特征离子质荷比+(葡萄糖基质荷比×n)，n为正整数；

(6)二级质谱分析中，获得甜叶醇的C13位的葡萄糖基数量；该数量的计算有两种情况：(a)在给定条件下的二级质谱中若不存在明显的最高丰度的离子片断峰，该数量为B类离子数量加1；其中，B类离子质荷比在甜叶醇离子与[M-H]^-之间，且其质荷比＝甜叶醇离子质荷比+(葡萄糖基质荷比×n)，n为正整数；(b)在给定条件下的二级质谱中存在明显的最高丰度的离子片断峰，则该数量为C类离子数量加1；其中，C类离子的质荷比在甜叶醇离子与最高丰度的特征离子之间，且其质荷比＝最高丰度的特征离子质荷比+(葡萄糖基质荷比×n)，n为正整数；结合第(3)、(5)、(6)中的任意两项或两项以上的内容，即可判断待测甜菊糖苷中在甜叶醇的C13位和C19位的葡萄糖基数量。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：待测甜菊糖苷以溶液形态进行质谱检测，该溶液使用甲醇或含水甲醇为溶剂。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：一级质谱的参数设置至少包括如下的一种或两种以上：毛细管电压(-2～3kV)；采样锥孔电压35～100V；萃取锥孔电压1～5V；源温度80～120℃；脱溶剂温度120～400℃；脱溶剂气体流速100～800升/小时。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：二级质谱的参数设置至少包括如下的一种或两种以上：碰撞气体流速0.3～0.6升/小时；碰撞能量10～100eV。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：碰撞能量选自20～50eV。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：质谱检测中选用的气体为氮气或氩气。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述方法是鉴定天然甜菊糖苷、或C13位和C19位连接的糖基均为葡萄糖基的甜菊糖苷。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：所述天然甜菊糖苷、或C13位和C19位连接的糖基均为葡萄糖基的甜菊糖苷，包括甜菊苷、甜菊糖苷B、甜菊双糖苷、甜茶素、甜菊糖苷A、甜菊糖苷E、甜菊糖苷D、甜菊糖苷M中的任意一种或两种以上。

9.根据权利要求1、7、8任意一项所述的方法，其特征在于：所述待测甜菊糖苷若为两种以上甜菊糖苷的混合物，每种甜菊糖苷的分子量不同。