[发明专利]基于唾液特异糖蛋白糖链结构的肝病/肝硬化相关筛查、评估的产品及应用

说明书

本发明公开了基于唾液特异糖蛋白糖链结构的肝病/肝硬化相关筛查、评估的产品及应用，针对唾液样本，提供了两种用于肝病/肝硬化筛查、早期诊断、风险评估、药物筛选和/或疗效评估的产品，其中一种产品检测唾液样本中的三种特定糖蛋白糖链结构β‑D‑GlcNAc，Galβ1‑4GlcNAc和(GlcNAcβ1‑4)n的表达水平(是否高表达)，另一种产品检测唾液样本中是否含有特定的11种N‑糖链之任一或任意组合。相应的，起到特异性结合识别作用的凝集素为DSA，能够单独作为识别唾液特异糖蛋白糖链结构的试剂用以制备相关医疗产品。

技术领域

本发明涉及一种基于唾液特异糖蛋白的肝病(尤其是肝硬化)标志物的确定及其相关产品、应用。

背景技术

肝硬化(Hepatic Cirrhosis，HC)是我国常见的一种慢性肝病，多见于病毒性肝炎、脂肪性肝病的预后。目前，肝硬化的各种检测方法分别受其技术特点的限制，均存在特异性低、取样不便和不能早期诊断等缺陷。近年来有研究表明：随着肝病的发生发展，患者的肝组织、以及血清和唾液等体液中发生了糖蛋白糖基化异常改变。

专利文献CN105675893A公开了一种基于血清/共同基于血清和唾液中蛋白检测糖链标志物以鉴别肝炎患者的方案。其中：

基于血清检测时，当PTL-I、PNA、AAL、LTL、STL、BS-I、PTL-II、SBA、UEA-I、MAL-I、PHA-E+L都上调，同时ACA下调时可以将其与健康人区别，即患有肝病；在此基础上，当WFA、GSL-II、MAL-II、SJA、LEL、PWM、BPL都上调，同时EEL下调时，可以确定样品对应的人群患有重型乙型肝炎。

基于血清和唾液共同检测时，当STL、SBA、WFA、GSL-II都上调，同时ACA下调时可以将其与健康人区别，即患有肝病。

上述方案在检测样本时所需凝集素较多，且需作组合统计，因此对于肝硬化(HC)的筛查、诊断以及评估仍不够简便、有效。

有必要指出的是，血液中的一些因子能够随体液循环到达唾液腺，或随唾液分泌进入口腔或导致唾液中的基因转录谱发生改变，引起某些蛋白质的丰度或种类改变，从而反映出血液中部分蛋白质水平的变化。但目前研究发现，人唾液中有1939种蛋白质，人血浆中有3020种蛋白质，仅有27％的唾液蛋白质组与血浆蛋白质组重合。血浆蛋白质组学发现的177个与心血管疾病相关的潜在生物标志物的蛋白质中，也仅有40％的蛋白质出现在唾液蛋白质组中；在已列出的1058个潜在癌症相关生物标志物的蛋白质中，仅有34％的蛋白质出现在唾液蛋白质组中。这表明许多血液循环中的生物标志物并非能够在唾液中得到鉴定。另外，即使是同一种蛋白，较之于血清，其在唾液中的含量通常明显较低。所以在实践中，两者没有必然的联系，往往需要研究人员经过大量的实验和分析，才能判断是否有蛋白质组重合的可能性。

也因此，上述方案只得分别基于血清检测、基于血清和唾液共同检测给出不同的方案。

发明内容

关于肝硬化(HC)的筛查、诊断以及评估等，发明人通过大量实验和分析，确定了以下结论：

一、相比唾液中其它糖蛋白糖链结构，凝集素DSA所识别的β-D-GlcNAc，Galβ1-4GlcNAc和(GlcNAcβ1-4)n糖链结构在肝病患者(乙型肝炎(HB)、肝硬化(HC)、肝癌(HCC))唾液中呈现为高表达(P≤0.0343)；且相比健康志愿者(HV)、乙肝和肝癌，β-D-GlcNAc，Galβ1-4GlcNAc和(GlcNAcβ1-4)n糖链结构在HC患者唾液中表达水平最高(p≤0.0034)。

二、以下11种N-糖链仅存在于HC患者的唾液中，而未见于HV、HB和HCC的唾液中。