[发明专利]一种提取羊毛角蛋白的方法有效
申请号: | 201811028704.4 | 申请日: | 2018-09-05 |
公开(公告)号: | CN109111516B | 公开(公告)日: | 2021-08-27 |
发明(设计)人: | 王秉;李青青;刘林帅;欧阳毅;彭志勤;胡智文 | 申请(专利权)人: | 浙江理工大学 |
主分类号: | C07K14/47 | 分类号: | C07K14/47;C07K1/34 |
代理公司: | 嘉兴永航专利代理事务所(普通合伙) 33265 | 代理人: | 侯兰玉 |
地址: | 310018 浙江省杭*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 提取 羊毛 角蛋白 方法 | ||
1.一种提取羊毛角蛋白的方法,其特征在于,以g和mL计,步骤如下:
A)取羊毛添加至乙醇中,搅拌1-3h后,用去离子水冲洗并烘干;
B)取4-6g烘干的羊毛以1:18-20 的浴比添加至CB 9.6缓冲液中,加入1-1.4g亚硫酸钠,在55-65℃下反应25-35min,用去离子水冲洗3-5次烘干;
C)取步骤B)处理后的羊毛1.8-2.2g浸入18-22ml 1-乙基-3-甲基咪唑磷酸二乙酯盐离子液体中,再加入20-25ml的二甲基亚砜,进行超声处理;
D)向步骤C)所得溶液中加入18-22ml 1-烯丙基-3-甲基咪唑醋酸盐离子液体,再加入20-25ml的二甲基亚砜,进行超声处理;
E)将步骤D)所得溶液离心处理,离心速率为7000-8000r/min,离心时间为8-12min,取上层清液;
F)将上清液装入透析袋透析,冷冻干燥,研磨,得到羊毛角蛋白。
2.如权利要求1所述的一种提取羊毛角蛋白的方法, 其特征在于,步骤A)中,称取8-12g羊毛添加至180-200ml乙醇中,在40℃下搅拌2h后,用去离子水冲洗3-5次烘干。
3.如权利要求1所述的一种提取羊毛角蛋白的方法, 其特征在于,步骤C)中,1-乙基-3-甲基咪唑磷酸二乙酯盐离子液体的配制方法为:将N-甲基咪唑和磷酸三乙酯按1:1.1摩尔比混合加入到圆底烧瓶中,在130-150℃下加热搅拌反应10-15h,所得产物用乙醚洗涤多次并用分液漏斗分离,将下层液相用旋转蒸发仪旋蒸3-5h后真空干燥1-3天。
4.如权利要求1所述的一种提取羊毛角蛋白的方法, 其特征在于,步骤D)中,1-烯丙基-3-甲基咪唑醋酸盐离子液体的配制方法为:将N-甲基咪唑和烯丙基氯按1:1.2摩尔比混合,在氮气环境下水浴加热50-60℃回流,同时机械搅拌1h,用丙酮洗涤三次后,在65-75℃下旋蒸0.8-1.2h,最后在75-85℃下真空干燥1-3天。
5.如权利要求1所述的一种提取羊毛角蛋白的方法, 其特征在于,步骤C)和步骤D)中,超声功率为260-300W,超声时间为25-30min。
6.如权利要求1所述的一种提取羊毛角蛋白的方法, 其特征在于,步骤F)中,透析袋的分子截留量为4000,透析过程中每5-7h换一次水,透析2-3天。
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