[发明专利]普鲁士蓝纳米MRI示踪剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种普鲁士蓝纳米MRI示踪剂的制备方法，其特征在于，步骤如下：

1)制备半胱氨酸修饰的β-淀粉样蛋白42

在β-淀粉样蛋白42上第28位的赖氨酸和第29位的甘氨酸之间插入含有巯基的半胱氨酸，合成半胱氨酸修饰的β-淀粉样蛋白42，其序列是：DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNK(Cys)GAIIGLMVGGVVIA；

2)制备马来酰亚胺化的普鲁士蓝纳米颗粒

将0.5mM柠檬酸的FeCl3·6H2O去离子水混合液和柠檬酸的1mM K4Fe(CN)6去离子水混合液在60℃下逐滴混合，持续搅拌5min，加入0.005mM聚醚酰亚胺溶液，持续搅拌4小时，然后离心分离，收集沉淀并用丙酮和去离子水洗涤，用二甲基亚砜重悬，即得氨基化的普鲁士蓝纳米颗粒；

将马来酸酐的二甲基亚砜溶液加入到上述制备的氨基化的普鲁士蓝纳米颗粒的溶液中，持续搅拌1～3天，离心分离，洗涤，重悬，得溶液A；将N-(2-羟乙基)马来酰亚胺的N,N-二甲基甲酰胺溶液加入到溶液A中，持续搅拌，离心分离，洗涤，用磷酸盐溶液重悬，即得马来酰亚胺化的普鲁士蓝纳米颗粒；

3)制备结合了半胱氨酸修饰的β-淀粉样蛋白42的马来酰亚胺化的普鲁士蓝纳米颗粒

将步骤1)制备的半胱氨酸修饰的β-淀粉样蛋白42和步骤2)制备的马来酰亚胺化的普鲁士蓝纳米颗粒按质量比8：1-12：1于4℃混匀悬培2-6h，离心，洗涤，最后用磷酸盐溶液重悬，置于4℃冰箱保存待用，得到结合了半胱氨酸修饰的β-淀粉样蛋白42的马来酰亚胺化的普鲁士蓝纳米颗粒。

2.根据权利要求1所述的普鲁士蓝纳米MRI示踪剂的制备方法，其特征在于，步骤1)所述半胱氨酸修饰的β-淀粉样蛋白42的序列是SEQ ID NO.1所示的序列。

3.根据权利要求1所述的普鲁士蓝纳米MRI示踪剂的制备方法，其特征在于，步骤3)中半胱氨酸修饰的β-淀粉样蛋白42与马来酰亚胺化的普鲁士蓝纳米颗粒的质量比为10：1。

4.一种如权利要求1所述方法制备的普鲁士蓝纳米MRI示踪剂。

5.根据权利要求4所述的普鲁士蓝纳米MRI示踪剂，其特征在于，所述普鲁士蓝纳米MRI示踪剂表面带负电荷，颗粒为立方体结构，粒径为60～70nm。

6.一种如权利要求1所述方法制备的普鲁士蓝纳米MRI示踪剂在制备用于阿尔兹海默症诊断的制剂中的应用。