[发明专利]一种利用黑芥子硫苷酸钾合成纳米银的方法

说明书

本发明涉及一种利用黑芥子硫苷酸钾合成纳米银的方法，包括以下步骤：步骤1）、秤取黑芥子硫苷酸钾配成1mg/mL的黑芥子硫苷酸钾溶液；步骤2）、秤取硝酸银粉末并将其溶解在水中配制成1mM的硝酸银溶液；步骤3）、将黑芥子硫苷酸钾溶液和硝酸银溶液以1:1比例混和，在30~60℃温度下搅拌1~6h；步骤4）、将混合溶液移入透析袋中透析24h；步骤5）、将透析后的混合溶液移入试管中，冷冻干燥后加入去离子水配成1mM纳米银溶液；利用分光光度计检测纳米银在420nm光吸收特征，实现利用黑芥子硫苷酸钾合成纳米银。通过本发明，利用纯天然物质合成，成本低且环境友好，是一种制备功能纳米材料的简单方法，合成的纳米银具有较好的抗肿瘤效果。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，具体涉及一种利用黑芥子硫苷酸钾合成纳米银的方法，并应用于治疗宫颈癌细胞(Hela)等肿瘤细胞。

背景技术

基于微生物或植物成分的生物还原法，具有绿色环保、成本低等优点，是一种具有发展前景的纳米银制备方法。纳米银由于其原子排列表现为介于固体和分子之间的“介态”，表现出量子效应、小尺寸效应和极大的比表面积，可以有效地抑制或杀死肿瘤细胞。因此，可以应用纳米银开展治疗肿瘤等方面的研究。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种利用黑芥子硫苷酸钾合成纳米银的方法，即，利用黑芥子硫苷酸钾(sinigrin)合成20nm大小的纳米银的简单方法，并能用于抗肿瘤研究。

本发明的目的是这样实现的，一种利用黑芥子硫苷酸钾合成纳米银的方法，其特征是，包括以下步骤：

步骤1）、秤取黑芥子硫苷酸钾sinigrin配成1mg/mL的黑芥子硫苷酸钾溶液；

步骤2）、秤取硝酸银粉末并将其溶解在水中配制成1mM的硝酸银溶液；

步骤3）、将经步骤1）配成的黑芥子硫苷酸钾溶液和经步骤2）配成的硝酸银溶液以1:1~1:10比例混和，并将黑芥子硫苷酸钾溶液、硝酸银溶液在30~60℃温度下搅拌1~6h得到混合溶液，在此过程中可看到混合溶液由黄色变成深褐色；

步骤4）、将经步骤3）处理得到的混合溶液移入透析袋中透析24 h；

步骤5）、将经步骤4）透析后的混合溶液移入试管中，冷冻干燥后，加入去离子水配成1mM纳米银溶液；利用分光光度计检测纳米银在420 nm光吸收特征，通过透射电镜检测合成纳米银大小，实现利用黑芥子硫苷酸钾合成纳米银。

步骤3）中，申请人做实验时黑芥子硫苷酸钾溶液、硝酸银溶液按照1:1~1:10比例混合，并搅拌1~6h的条件进行，最后得出结论是，1：1比例混合、在40℃条件搅拌1h到最好结果；因此，优选的，黑芥子硫苷酸钾溶液、硝酸银溶液在40℃温度下搅拌1h得到混合溶液。

步骤3）中，黑芥子硫苷酸钾溶液、硝酸银溶液混合得到的混合溶液pH值为8。

步骤4）中，透析袋为12kDa大小的透析袋。

步骤5）中，试管为50mL的试管。

步骤5）中，合成的纳米银在420nm处有特征吸收峰，纳米银直径大小分布在10~25nm之间，纳米银平均直径为20nm。

将人宫颈瘤细胞Hela在含10%胎牛血清的DMEM中培养24 h，用0~10μM溶度的纳米银处理24 h，用CCK-8 细胞毒性试剂盒检测纳米银对Hela细胞毒性作用。