[发明专利]一种获得假俭草突变体的方法

说明书

本发明提供了一种获得假俭草突变体的方法，属于草坪草生物技术领域。本发明所述方法包括以下步骤：1)诱变愈伤组织的获得；2)诱变愈伤组织进行分化培养，得诱导苗；3)诱导苗接种进行生根培养，得完整植株；4)完整植株进行筛选，得变异植株；5)变异植株进行扦插繁育，鉴定突变性状，获得稳定遗传的假俭草突变体。利用本发明的方法，一次诱变可获得23～35株完整植株，有5～10株完整植株在一种或多种性状上发生变异，性状变异率为21.73～28.57％；有2～3株发生DNA变异，变异率为5.7～8.7％。

技术领域

本发明属于草坪草生物技术领域，具体涉及一种获得假俭草突变体的方法。

背景技术

假俭草(Eremochloa ophiuroides(Munro.)Hack.)是起源于我国的优良暖季型草坪草和牧草，具有叶形优美、绿期长、耐瘠薄、病虫害少、养护水平低等优点，因此被誉为“中国最好的暖季型草坪草”，广泛用于庭院草坪、休憩草坪及护坡草坪的建植，尤其适合水土保持和大面积的景观建设。随着全球水资源和能源的日益枯竭以及生态文明建设重要性日益突出，对假俭草尤其是品质好、性状优良的假俭草品种的需求日益增加。然而现有假俭草品种单一，难以满足生产需求。目前生产上所用的假俭草品种都是通过对野生资源的筛选培育或是通过杂交育种得来，但是其育种周期长，工作量大，变异幅度小，短时间内难以获得优良品种，显著影响假俭草的育种进程。因此，为了满足生产上对假俭草优良品种的需要，研究开发快速、高效的育种创新技术具有重要的意义。

低温等离子体技术是促使农作物增产的现代生态农业新技术，广泛用于化工、医药、环保等领域，在农业上应用尚属新的研究领域。目前，低温等离子体在微生物突变体创制中得到应用。此外，低温等离子体诱变在小麦(CN103999593A)、玉米(CN104186060A)、花生(CN104012208B)、大豆(CN104620719A)、甘蓝(CN105580727A)、西葫芦(CN104855281A)、苜蓿(CN103718848A)等植物育种中也获得较好的进展，诱变材料均为种子。然而到目前为止，尚未见低温等离子体处理植物体细胞诱变育种的研究报道，也未见对草坪草(包括假俭草)诱变育种的研究报道。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种获得假俭草突变体的方法，该方法成本低、简便易行、安全环保，在较短时间内获得优良突变体。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种获得假俭草突变体的方法，包括以下步骤：

1)取假俭草愈伤组织进行低温等离子诱变，得诱变愈伤组织；

2)将步骤1)得到的所述诱变愈伤组织接种到分化培养基中进行分化培养，得诱导苗；所述分化培养基以MS培养基为基本培养基，还包括：1.8～3.5mg/L的激动素、0.05～0.2mg/L的萘乙酸、25～40g/L的蔗糖和1～5g/L的植物凝胶；

3)将步骤2)得到的所述诱导苗接种至生根培养基中进行生根培养，得完整植株；所述生根培养基以MS培养基为基本培养基，还包括0.2～1mg/L的萘乙酸、20～40g/L的蔗糖和1～5g/L的植物凝胶；

4)对步骤3)得到的所述完整植株进行筛选，得变异植株；

5)将步骤4)所述变异植株进行扦插繁育，获得假俭草突变体。

优选的，步骤1)所述假俭草愈伤组织的制备方法，包括：以消毒后假俭草幼穗为外植体，接种到诱导培养基中诱导培养18～25d，得假俭草愈伤组织；所述诱导培养基以MS培养基为基本培养基，还包括2,4-二氯苯氧乙酸1～5mg/L、6-苄氨基嘌呤0.04～0.2mg/L、蔗糖20～40g/L和植物凝胶1～5g/L。

优选的，所述诱导培养为暗培养，培养温度为25±1℃。