[发明专利]一种可检测过敏反应的纸基传感器及其制备和应用

权利要求书

1.一种可检测过敏反应的纸基传感器，其特征在于，所述的纸基传感器是用来检测过敏反应的，先在层析纸上制备得到检测区域，并对其进行修饰产生醛基，然后与高亲和络合物镍-氨三乙酸Ni-NTA结合，使其螯合带有组氨酸His标签的过敏原，从而检测血清中的免疫球蛋白IgE，实现对过敏反应的检测。

2.一种如权利要求1所述的可检测过敏反应的纸基传感器的制备方法，其特征包括如下步骤：

步骤1：利用等离子清洗机对层析纸进行等离子体处理，使纸表面产生醛基；利用蜡打印机在纸上打印出微流控检测区域，并将打印好的层析纸置于烘箱中烘烤，使蜡熔化并穿透纸张厚度，形成亲水-疏水壁垒；

步骤2：在层析纸的检测区域滴加Ni-NTA，室温下放置直至干透；

步骤3：在检测区域滴加带有组氨酸His标签的过敏原，并用pH为7.4的磷酸盐缓冲液清洗，即得可检测过敏反应的纸基传感器，然后对血清中的免疫球蛋白IgE进行检测。

3.根据权利要求2所述的可检测过敏反应的纸基传感器的制备方法，其特征在于，步骤1中等离子清洗机工作参数为工作电源13.56MHZ，射频功率为80-100W，处理时间为3-5min。

4.根据权利要求2所述的可检测过敏反应的纸基传感器的制备方法，其特征在于，步骤1中烘烤温度为100℃，时间90s，检测区为直径3-6mm的圆孔，边缘为亲疏水通道。

5.根据权利要求2所述的可检测过敏反应的纸基传感器的制备方法，其特征在于，步骤2中Ni-NTA的制备，其制备方法如下：

(1)NTA：0℃下，将N-碳苄氧基赖氨酸0.5-2g和溴乙酸1.05-2.1g按摩尔比为1:3.5-5溶解于氢氧化钠中，再加入到烧瓶中，混合均匀后室温下搅拌1.5-3h，然后加热到50℃反应15-20h；0℃下，将浓盐酸加入到反应后的溶液中，形成沉淀，减压过滤形成白色粉末；将所述白色粉末溶解于甲醇中，加入10％的钯碳，向烧瓶中充满氢气，反应混合物在室温下搅拌10-16h，将溶液在减压条件下过滤去除钯碳得到NTA，反应式如下：

(2)Ni-NTA：取所述氨三乙酸0.5-2g与氯化镍1.25-5mL溶解于去离子水中，按摩尔比1:1-2反应，室温下在摇床上摇晃0.5-2h，得到Ni-NTA，

其结构式如下：

6.根据权利要求5所述的可检测过敏反应的纸基传感器的制备方法，其特征在于，所述的Ni-NTA的制备方法步骤(1)中，N-碳苄氧基赖氨酸一定要缓慢滴加到烧瓶中，否则会导致反应不完全。

7.根据权利要求2所述的可检测过敏反应的纸基传感器的制备方法，其特征在于，Ni-NTA 2.5-10μL与过敏原1.5-6μL的体积比为1:0.4-2。

8.根据权利要求2所述的可检测过敏反应的纸基传感器的制备方法，其特征在于，步骤3中过敏原1.5-6μL与免疫球蛋白1.5-6μL的体积比为1:0.5-2，室温下孵育10-30min，pH为7.4的磷酸盐缓冲液的浓度是0.01mol/L，清洗2-4次，每次5-20μL。

9.根据权利要求1所述的可检测过敏反应的纸基传感器的应用，其特征在于，其所述的纸基传感器可应用于检测人血清中免疫球蛋白IgE试剂盒的制备，从而实现对过敏反应的精确、快速检测。