[发明专利]基于石墨烯复合物的前列腺特异抗原检测方法在审
申请号: | 201810947029.9 | 申请日: | 2018-08-20 |
公开(公告)号: | CN109239345A | 公开(公告)日: | 2019-01-18 |
发明(设计)人: | 缪鹏;孟凡渝;陈锡峰;杨大威;郭振振 | 申请(专利权)人: | 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所 |
主分类号: | G01N33/574 | 分类号: | G01N33/574;G01N33/543;G01N33/68;G01N27/327;G01N27/48 |
代理公司: | 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙) 11369 | 代理人: | 韩飞 |
地址: | 215163 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 前列腺特异抗原 检测 石墨烯复合物 定量分析 对电极 多肽 预处理 复合纳米材料 前列腺癌症 特异性切割 多肽修饰 早期诊断 灵敏度 电极 石墨烯 修饰 切割 治疗 应用 | ||
1.一种基于石墨烯复合物的前列腺特异抗原检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)对电极进行预处理;
2)利用设计出的可被PSA特异性切割的多肽对电极进行修饰;
3)将多肽修饰后的电极与PSA反应,对多肽进行特异性的识别和切割;
4)利用石墨烯@银复合纳米材料进行信号放大反应;
5)对PSA进行定量分析和检测。
2.根据权利要求1所述的基于石墨烯复合物的前列腺特异抗原检测方法,其特征在于,所述步骤1)中电极为金电极,预处理的步骤具体包括:
1-1)先对电极表面进行打磨,再进行机械抛光,获得镜状表面;
1-2)用超纯水将电极冲洗干净,再先后用乙醇和超纯水进行超声处理,以除去任何粘附的氧化铝;
1-3)用水虎鱼溶液清洗电极,再用超纯水冲洗干净;
1-4)用H2SO4溶液对电极进行电化学清洗;
1-5)将电极用氮气干燥以便进行下一步修饰。
3.根据权利要求2所述的基于石墨烯复合物的前列腺特异抗原检测方法,其特征在于,所述步骤1-1)中先用P3000和P5000碳化硅砂纸进行打磨,然后用1.0、0.3和0.05μm的氧化铝粉末依次进行机械抛光;步骤1-3)的水虎鱼溶液中,H2SO4:H2O2=3:1;步骤1-4)中用0.5MH2SO4溶液进行电化学清洗,以去除任何多余的化合物。
4.根据权利要求1所述的基于石墨烯复合物的前列腺特异抗原检测方法,其特征在于,所述步骤2)具体包括:将预处理后的电极与多肽溶液反应后,然后在MCH中浸泡处理,最后用超纯水清洗,并在氮气流中干燥。
5.根据权利要求4所述的基于石墨烯复合物的前列腺特异抗原检测方法,其特征在于,所述步骤2)中多肽溶液中还包括HEPES、TCEP,其pH为7.0。
6.根据权利要求1所述的基于石墨烯复合物的前列腺特异抗原检测方法,其特征在于,所述步骤2)中多肽为:N’-CGGHSSKLQFWYFWY-C’。
7.根据权利要求6所述的基于石墨烯复合物的前列腺特异抗原检测方法,其特征在于,所述步骤3)具体为:将多肽修饰的电极浸入不同浓度的PSA溶液中,进行多肽特异性的识别和切割,反应后,将电极用超纯水冲洗。
8.根据权利要求7所述的基于石墨烯复合物的前列腺特异抗原检测方法,其特征在于,所述步骤4)中具体包括:将所述步骤3)得到的电极浸泡在GO溶液中处理后,将电极清洗,再放入AgNO3溶液中反应,反应后用超纯水清洗。
9.根据权利要求8所述的基于石墨烯复合物的前列腺特异抗原检测方法,其特征在于,所述步骤4)中具体包括:将所述步骤3)得到的电极浸泡在1mg/mL GO溶液中处理后,将电极清洗,再放入到pH为8.0的20mM AgNO3溶液中反应1小时,温度设定为60℃,反应后用超纯水清洗。
10.根据权利要求1所述的基于石墨烯复合物的前列腺特异抗原检测方法,其特征在于,所述步骤5)中采用电化学检测手段进行PSA的定量分析和检测,具体为采用交流阻抗法来监测多肽与GO、纳米银组装是否成功,采用线性扫描伏安法对PSA进行定量检测。
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