[发明专利]靶向β-环糊精接枝壳聚糖离子交联纳米粒的载药系统及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种靶向β-环糊精接枝壳聚糖离子交联纳米粒的载药系统，其特征在于：将β-环糊精接枝在壳聚糖大分子上，再联合透明质酸HA制得β-CD-CS/HA，再通过离子交联法制得纳米粒，最后包裹厄洛替尼Erlotinib制得Erlotinib@β-CD-CS/HA纳米载药系统。

2.一种制备如权利要求1所述的靶向β-环糊精接枝壳聚糖离子交联纳米粒的载药系统的方法，其特征在于：具体制备步骤包括：

（1）称取纯化后的壳聚糖加至烧杯中，逐滴滴入体积浓度1％的乙酸溶液搅拌溶胀溶解壳聚糖，搅拌24小时，得到粘稠透明的壳聚糖溶液；

（2）称取C₂H₃ClO₂，将其溶于超纯水中；称取β-环糊精，使其溶于质量分数为25%的NaOH溶液，逐滴滴入配制好的C₂H₃ClO₂溶液中，室温下反应，使用冰乙酸调节pH至7，4℃放置16h，然后加入甲醇，直到不再有沉淀生成，放置12h后，再过滤，之后继续加水溶解，再加甲醇，直到不再有沉淀生成，过滤，所得产物用足量乙醇水溶液反复洗涤，至无氯为止，干燥，得白色产物，即为羧甲基-β-环糊精；

（3）将羧甲基-β-环糊精溶于去离子水中，测量溶液的pH值，用稀冰乙酸调节pH，控制反应体系的pH值在3~4，再加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺冰盐酸盐 EDC 和N-羟基琥珀酰亚胺NHS活化羧基，在室温下、搅拌的条件下反应4个小时，活化羧甲基-β-环糊精上的羧基；

（4）将透明质酸溶于去离子水中，测量溶液的pH值，用稀冰乙酸调节pH，控制反应体系的pH值在3~4，再加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺冰盐酸盐EDC 和N-羟基琥珀酰亚胺NHS活化羧基，在室温下、搅拌的条件下反应4个小时，活化透明质酸上的羧基；

（5）将步骤（2）制备的活化好的羧甲基-β-环糊精加入到壳聚糖溶液中，调节pH，控制体系pH在3~4之间，4h后，把步骤（4）中活化好羧基的透明质酸加入到壳聚糖和制备的活化好的羧甲基-β-环糊精反应体系中，在室温条件下持续搅拌，反应48小时，将产物使用透析袋透析，高速低温离心，于- 80℃预冻，真空冻干至恒重，获得的产物即为β-CD-CS/HA；

（6）将步骤（5）制备的羧甲基-β-环糊精接枝壳聚糖/透明质酸β-CD-CS/HA溶于1wt％的冰乙酸溶液，形成1wt％的羧甲基-β-环糊精接枝壳聚糖/透明质酸溶液，超声处理20-30分钟，用微孔过滤器过滤，得到羧甲基-β-环糊精接枝壳聚糖/透明质酸滤液，在超声条件下逐滴滴入三聚磷酸钠TPP溶液，通过离子交联法制得纳米粒，反应0.5~1小时，过滤，滤液于零下70摄氏度冷冻干燥至恒重，得到干燥的羧甲基-β-环糊精接枝壳聚糖离子交联纳米粒 β-CD-CS/HA NPs；

（7）室温下，将100 µL厄洛替尼的良溶剂溶液逐滴加入到700 µL不良溶剂中，然后加入100 µL β-CD-CS/HA NPs溶液，振荡1分钟后，超声30分钟以上，制得Erlotinib@β-CD-CS/HA离子交联纳米载药系统。

3.根据权利要求2所述的靶向β-环糊精接枝壳聚糖离子交联纳米粒的载药系统的制备方法，其特征在于：其中壳聚糖、β-环糊精的摩尔比为1~8:1~4。

4.根据权利要求2所述的靶向β-环糊精接枝壳聚糖离子交联纳米粒的载药系统的制备方法，其特征在于：步骤（3）和步骤（4）中1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺冰盐酸盐EDC和N-羟基琥珀酰亚胺NHS活化羧基的摩尔比为1:1。

5.根据权利要求2所述的靶向β-环糊精接枝壳聚糖离子交联纳米粒的载药系统的制备方法，其特征在于：步骤（3）中羧甲基-β-环糊精、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺冰盐酸盐EDC、N-羟基琥珀酰亚胺NHS的摩尔比为2:2:1。

6.根据权利要求2所述的靶向β-环糊精接枝壳聚糖离子交联纳米粒的载药系统的制备方法，其特征在于：步骤（4）中透明质酸、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺冰盐酸盐EDC、N-羟基琥珀酰亚胺NHS摩尔比为2:2:1。