[发明专利]一种盐酸吉西他滨中手性异构体的检测方法

说明书

本发明公开了一种盐酸吉西他滨中手性异构体的检测方法，它包括如下步骤：高效液相色谱仪的固定相为硅胶表面共价键合有直链淀粉‑三（3,5‑二甲基苯基氨基甲酸酯）的手性色谱柱，流动相水‑甲醇=45:55～55:45，柱温为30℃～40℃，检测波长为230nm～234nm。吸取供试品溶液、空白溶液各20µl注入液相色谱仪，记录色谱图。按归一化法计算样品中所含手性异构体的含量。本发明应用高效液相色谱法分离，分离效率高、分析速度快、检测灵敏度高，通过检测盐酸吉西他滨中手性异盐酸吉西他滨中手性异构体构体含量，能够更好控制盐酸吉西他滨的质量，更好的对进行检测。

技术领域

本发明涉及高效液相色谱技术领域，具体涉及一种盐酸吉西他滨中手性异构体的检测方法。

背景技术

具体涉及一种盐酸吉西他滨（（+） 2‘-脱氧-2， 2‘-二氟胞嘧啶盐酸盐）的异构体检测方法。

盐酸吉西他滨是细胞周期特异性抗代谢类药物，主要作用于 DNA 合成期的肿瘤细胞，即S期细胞，在一定条件下，可以阻止G1期向S期的进展，是治疗晚期非小细胞肺癌的最新一线较为安全有效的化疗用药，还可以用于治疗胰腺癌。

目前文献报道的关于盐酸吉西他滨的合成大都是以羟基保护的D-赤式-2，2’- 二氟-1-羰基核糖为中间体。L.W.Hertel等人首先以R-2，3-O-缩丙酮-甘油醛为原料，合成了D-赤式-2-脱氧-2，2’-二氟-3，5-O-特丁基二甲基硅基-1-羰基核糖并进一步合成了2’-脱氧-2，2’- 二氟苷尿(J.Org.Chem.，1988，2406)。该反应利用了底物控制的不对称Reformatsky 反应，但选择性不高，会有大量异构体生成。

T.S.Chou 等人对上述路线进行了改进 (Synthesis，1992，565)，将不对称Reformatsky 反应顺反产物的混合物直接用于反应，最后用结晶法处理产物，也会有异构体生成。

Osamu Kitagawa 曾尝试使用碘代二氟乙酸酯为原料，并在反应中加入三烷基氯硅烷的方法提高顺反产物的选择性，(Tetrahdron Lett.，1988，29，1803)，YasushiMatsumra等人以 (R)-2，3-O-缩环己酮-甘油醛为原料，在反应体系中添加 Titanocene 催化剂，进而提高顺反产物的选择性 (J.Flurine chem.，1992，57，203)，该方法也需要通过一定的技术手段来检测是否有异构体生成。

因此，寻找一种手段检测并控制盐酸吉西他滨中异构体的检测方法量具有重要的现实意义。

发明内容

本发明的目的是建立一种盐酸吉西他滨中手性异构体的检测方法，可以更好的控制盐酸吉西他滨的质量，更好的对盐酸吉西他滨中存在的异构体进行检测。

本发明的技术方案是：高效液相色谱测定盐酸吉西他滨中手性异构体的检测方法，它包括如下步骤：

系统测试液的制备：称取盐酸吉西他滨手性异构体对照品、置量瓶中，另称取盐酸吉西他滨对照品适量，加流动相溶解并稀释制成每1ml中约含盐酸吉西他滨中手性异构体0.5mg、盐酸吉西他滨0.5mg的混合溶液溶液，作为系统测试液；

供试品溶液制备：精密称取本品适量置容量瓶中加流动相溶解并稀释制成每1ml中约含盐酸吉西他滨1.0mg的溶液，作为供试品溶液；

空白溶液的制备：流动相；

测定：高效液相色谱仪的固定相为硅胶表面共价键合有直链淀粉-三（3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯）的手性色谱柱；

流动相为水-甲醇=50:50，柱温为35℃，检测波长为232nm。吸取系统测试液、供试品溶液、空白溶液各20µl注入液相色谱仪，记录色谱图，读取数据；