[发明专利]一种测定奶粉中维生素A,E的方法

说明书

本发明涉及一种测定奶粉中维生素A,E的方法，包括以下步骤：1)样品处理：将奶粉样品混匀，称取适量，加入水、无水乙醇、抗坏血酸、BHT及KOH水溶液，加热皂化，皂化完成后冷却定容；2)采用结合柱切换技术的双梯度液相色谱仪测定步骤1)所得溶液中是否含有维生素A,E：若液相色谱结果显示样品疑似含有维生素A,E时，则比较样品与维生素A,E标准物质的保留时间，以确认样品中是否含有维生素A,E；3)若确认样品中含有维生素A,E，则通过公式计算样品中维生素A,E的含量；本发明简化了操作步骤，消耗溶剂少，大大缩短了前处理时间，节省了人力，实现了自动在线净化检测，提高了灵敏度，保证了测试结果的准确性和再现性。

[技术领域]

本发明属于分析化学技术领域，具体地说是一种测定奶粉中维生素A,E的方法。

[背景技术]

维生素广泛存在于各种生物体中，目前已发现的约有数十余类，其化学结构各异，有脂肪族、芳香族、脂环族、杂环和甾类化合物。在生理功能上，他们既也不是构成各种组织的主要原料，也不是体内能量的来源，但他们是参与调解物质代谢过程必不可少的小分子有机化合物。维生素A,E均为非极性疏水的异戊二烯衍生物，可溶于脂类和脂肪溶剂，而不溶于水，属于脂溶性维生素。摄入过多，摄入不均衡或缺乏都会引起相应的症状，影响身体的生长发育及我们的生活。

为了适应不同人的营养需求，预防营养不良等疾病，强化食品逐渐进入到我们的生活。维生素强化剂也是使用最早且应用最广泛的营养强化剂，被加入到多种食品中，为人体补充维生素。我国于1986年颁发“食品营养强化剂使用卫生标准(试行)”和食品营养强化剂卫生管理办法。1994年发布了GB 14880《食品营养强化剂使用标准》，目前更新至2012版，对规范我国的食品营养强化，指导企业生产，保障消费者健康安全起到了积极作用。其中对维生素A的使用量根据食品类别要求为600μg/kg-17000μg/kg，维生素E要求为5μg/kg-1450μg/kg。

蛋类，乳品等动物源食品是人体所需脂溶性维生素A,E的重要来源，但维生素A,E化学性质不稳定，很容易受光、空气、温度影响而被氧化分解，同时动物源食品中蛋白脂肪含量高，干扰因素多。因此，高效提取和测定复杂基质中的维生素A,E仍是维生素分析技术的难点。目前维生素A,E的分析方法主要有层析法，比色法，电化学法，气相色谱法和高效液相色谱法，其中以高效液相色谱法最常用。现行食品检验标准GB5009.82-2016在内的大多数在分析方法中，样品前处理主要包括皂化、萃取、浓缩、净化等步骤，涉及多次的蒸发溶解，操作繁琐费时，容易造成待测组分的损失，导致测定结果偏低，大大影响样品的分析效率。

2014年中粮营养健康研究院谢云峰等报道了在线固相萃取-高效液相色谱连用测定动物源食品中维生素A,E的方法，此方法避免了样品的萃取，浓缩等步骤，显著缩短了样品的前处理时间。但其前处理过程中，样品皂化冷却后需要调节pH值并加水定容。由于样品皂化溶液为强碱性，pH调节过程中会有放热现象出现，需要缓慢加入酸性溶液，比较耗时。同时受溶解度影响，样品中含有的脂肪、乳化剂、磷脂、甾醇等有机物质在溶液由碱性变为中性和水分含量增加的过程中逐渐析出。析出物吸附和包裹目标物维生素A,E，会导致测试结果偏低的情况出现。

[发明内容]

本发明的目的就是要解决上述的不足而提供一种测定奶粉中维生素A,E的方法，简化了操作步骤，消耗溶剂少，大大缩短了前处理的时间，节省了人力，实现了自动在线净化检测，提高了灵敏度，保证了测试结果的准确性和再现性。

为实现上述目的设计一种测定奶粉中维生素A,E的方法，包括以下步骤：

1)样品处理：将奶粉样品混匀，称取适量，加入水、无水乙醇、抗坏血酸、BHT及KOH水溶液，加热皂化，皂化完成后冷却定容；

2)采用结合柱切换技术的双梯度液相色谱仪测定步骤1)所得的溶液中是否含有维生素A,E：若液相色谱结果显示样品疑似含有维生素A,E时，则比较样品与维生素A,E标准物质的保留时间，以确认样品中是否含有维生素A,E；