[发明专利]修饰目的基因表达的组合物和方法

说明书

本发明涉及用于在果实胚乳中表达目的基因的特定启动子。本发明还描述含有该启动子的DNA构建体，以及使用这些构建体产生植物、植物细胞或原生质体的方法。专一地在目的器官中表达转基因使得能够仅在果实中积累外源转录物，并且相对于组成型表达来说是有利的，因为它使得更容易实现一些策略，这些策略的目的在于获得具有更高的附加值的品种，如：对环境胁迫的适应性，对病原体、害虫和农业防御措施的耐受性，营养和治疗价值的增加以及植物体中表达系统的新的替代，以更低的成本产生更具有竞争力的品种。此外，本发明还描述了具有组成型表达的序列，当需要组成型表达时为表达系统的实现提供替代。本发明的目的在于增加与转基因转化相关的经济、社会和环境效益，以及基因工程的生物安全性。

本申请是国际申请日为2013年04月09日、国际申请号为PCT/BR2013/000110、进入国家阶段的申请号为201380030230.6、发明名称为“修饰目的基因表达的组合物和方法”的PCT申请的分案申请。

技术领域

本发明涉及生物技术领域。更具体地，本发明涉及用于在果实胚乳中表达目的基因的特定启动子。本发明进一步描述含有与异源和/或内源基因可操作连接的本发明启动子的DNA构建体。此外，本发明涉及这些构建体以表达载体，重组载体形式的使用和在植物，植物细胞或转基因原生质体中的使用。本发明进一步描述使用这种含有本发明启动子的构建体产生植物，植物细胞或转基因原生质体的方法。因此，仅在目的部分表达转基因使得能够仅在果实中积累外源转录物，这有利于实现一些策略，这些策略目的在于除了具有高营养价值和高治疗价值的植物之外，还在于增加附加值，产生更适应环境胁迫，病原体和害虫，农业防御措施的品种。除了这些优点，本发明还是植物体中表达系统的新的替代，并可用于产生新的品种和改良方案。本发明的目的在于增加与转基因转化相关的经济，社会，环境和生物安全性利益。

背景技术

在过去的三十年，农业得益于与重组DNA技术相关的生物技术，植物组织的培养和用于产生除了具有更高营养价值(Aluru, M., Xu, Y., Guo, R., Wang, Z., Li, S.,White, W., Wang, K. Rodermel, S. 2008 Generation of transgenic maize withenhanced provitamin A content. J. Exp. Bot., v. 59, n. 3, p. 3551–3562)和更高治疗价值(Marcondes, J. Hansen, E. 2008 Transgenic lettuce seedlingscarrying hepatitis B virus antigen HBsAg. Braz. J. Infect. Dis., v.12, n. 6,p. 469-471)的植物之外，还有对除草剂有更强抗性的(Aragão, F.J.L., Vianna, G. R.,Albino, M.M.C. Rech, E.L. 2002 Transgenic Dry Bean Tolerant to theHerbicide Glufosinate Ammonium. Crop Science, v. 42, n. 4, p. 1298-1302)，对昆虫害虫 (insetos-praga) 有更强抗性的(Lilley C. J., Wang D., Atkinson H. J. Urwin P. E. 2010 Effective delivery of a nematode-repellent peptideusing.Plant Biotechnology Journal, pp. 1–11 doi: 10.1111/j.1467-7652.2010.00542.x，a root-cap-specific promoter)和耐旱的 (tolerant do drought)(Quan R, Hu S, Zhang Z, Zhang H, Zhang Z, Huang R. Overexpression of an ERFtranscription factor TSRF1 improves rice drought tolerance. Plant BiotechnolJ. 2010 May 1;8(4):476-88)的植物的经典改良方法。综合起来，这些特性导致生产增加，经济收益，种群质量的提高和环境的保护。通过转基因技术，能够引入目的基因，而不管其种间屏障。