[发明专利]快速检测药材中的黄曲霉毒素的方法和所用的试纸卡

权利要求书

1.检测药材中黄曲霉毒素的方法，该方法包括如下步骤：

(1)提供用于检测黄曲霉毒素的胶体金试纸卡；

(2)样品提取：

(2a)取待检药材或其饮片的粉末2克重量份，放入样品管中，加入4～8毫升体积份(例如6毫升体积份)的80～90％(例如85％)乙腈溶液至样品中，涡旋提取1～3分钟；静置1分钟后2000-5000rpm(例如3000-4000rpm)离心3～8分钟(例如5min)，移取2毫升体积份上清液至NH2/C18柱，过柱净化样品上清液，收集至干净试管；

(2b)移取3毫升体积份甲醇至NH2/C18柱，安装注射器装配，过柱弃去；移取3毫升体积份去离子水或蒸馏水至C18柱，安装注射器装配，过柱弃去，得经清洗的C18柱；

(2c)移取1.5毫升体积份步骤(2a)所得净化后的样品上清液至15毫升体积份离心管中，用10毫升体积份去离子水或蒸馏水稀释，混合；移取稀释样品至注射器，过NH2/C18柱，过柱液体弃去；加5毫升体积份去离子水或蒸馏水至离心管中，用于冲洗，转移至注射器，过柱弃去；用注射器或洗耳球按压C18柱顶部，使残留液体过柱，弃去废液；

(2d)移取1毫升体积份甲醇至经步骤(2c)处理的NH2/C18柱，过柱并收集二次净化样液至小离心管；移取100微升体积份二次净化样液，加入至提前准备的小离心管(内含1ml磷酸盐缓冲液)中，加盖，混合，作为提取液样品，待检；

(3)样品测定：移取步骤(2)所得提取液样品100～300μl，点于胶体金试纸卡上(样品垫部位)，在45℃条件下恒温孵育4-6分钟，用读数仪对检测条进行读数测定，并根据上样量和样品稀释倍数计算药材中的黄曲霉毒素含量。

2.根据权利要求1的方法，其中所述药材是根茎类药材。

3.根据权利要求1的方法，其中所述药材是根茎类药材，选自：大黄、丹参、黄连。

4.根据权利要求1的方法，其中所述胶体金试纸卡用于定量测定黄曲霉毒素，包括：样品垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和PVC背衬；硝酸纤维素膜黏附在PVC背衬上，样品垫和吸水垫分别黏附在硝酸纤维素膜上的两端；硝酸纤维素膜上依次分布样品垫、检测线T1、检测线T2、质控线、吸水垫。

5.根据权利要求1的方法，其中步骤(2a)中，所述80～90％(例如85％)乙腈溶液是指用磷酸盐缓冲液配制的含乙腈80～90％(例如85％)浓度的溶液。

6.根据权利要求1的方法，所述磷酸盐缓冲液(包括配制乙腈溶液所用的，以及步骤(2d)所用的)是磷酸根离子浓度为10～25mmol/L且pH值为7.0～8.0的磷酸盐缓冲液。

7.根据权利要求1的方法，其中步骤(2a)中，3000-4000rpm离心4～6min。

8.根据权利要求1的方法，其中步骤(2a)中，还向乙腈溶液中添加氯化钠；例如，以待检药材或其饮片的粉末每2克重量份计，氯化钠的量为0.1～0.4克重量份，例如0.2～0.3克重量份，例如0.25克重量份。

9.根据权利要求1的方法，其中步骤(2a)中，还向乙腈溶液中添加无水硫酸钠；例如，以待检药材或其饮片的粉末每2克重量份计，无水硫酸钠的量为0.05～0.3克重量份，例如0.1～0.2克重量份，例如0.15克重量份。

10.根据权利要求1的方法，其中试纸卡检测样品中黄曲霉毒素含量范围为0-150μg/kg。