[发明专利]一种防晒护肤品防晒功效的检测方法

权利要求书

1.一种防晒护肤品防晒功效的检测方法，其特征在于，具体方法为：

(1)将待检测的防晒护肤品溶解到含有斑马鱼的养殖水中，所述待检测的防晒护肤品在养殖水中的浓度为400-800mg/L；

(2)将含有待检测的防晒护肤品、斑马鱼的养殖水,于紫外线照射，以含有斑马鱼的养殖水组不经过紫外线照射为空白对照-UV，含有斑马鱼的养殖水组经过紫外线照射为模型对照+UV；

(3)取出步骤(2)中各组经过紫外线照射的斑马鱼，拍取斑马鱼卵黄囊以下至尾部的照片，聚焦在斑马鱼鱼鳍部位，测量斑马鱼鱼鳍面积；

(4)通过对比含有防晒护肤品养殖水中的斑马鱼鱼鳍与-UV和+UV中斑马鱼鱼鳍面积的大小，对所述防晒护肤品的防晒效果进行检测。

2.如权利要求1所述防晒护肤品防晒功效的检测方法，其特征在于，具体方法为：

(1)准备：

实验前，挑选一对雌雄斑马鱼于交配盒，用隔板将斑马鱼雌雄分开，夜晚或黑暗状态放置10h；第二天早上抽开隔板，斑马鱼交配产卵；捞出斑马鱼，收集斑马鱼鱼卵；

(2)以抽开隔板时间为0hpf(hours post-fertilization)，在72hpf时开始实验；

(3)具体实验：

A.配制好实验溶液，以养殖水组不经过紫外线照射为空白对照(-UV)，以养殖水组经过紫外线照射为模型对照(+UV)；

B.用玻璃平皿装载斑马鱼，用养殖水或PBS清洗2-3遍，将每条斑马鱼编号，置于体式显微镜下拍照；对体式显微镜进行长度标定，在体式显微镜5倍镜下进行拍照，拍取斑马鱼卵黄囊以下至尾部的照片，聚焦在斑马鱼鱼鳍部位，对应并记录好编号，用6孔板为实验容器，每孔1条斑马鱼，加入实验溶液5ml；

C.将加入实验溶液和斑马鱼的6孔板置于CL-1000紫外交联仪(波长302nm和365nm)下照射，每次照射30s，共照射5-6次；

D.照射完毕后，将斑马鱼从6孔板用塑料吸管吸出，用养殖水清洗1-2遍。然后将斑马鱼转移至24孔板，对应并记录好斑马鱼编号；将24孔板置于生化培养箱中培养；

E于紫外线照射后24、48h时，在体式显微镜5倍镜下进行拍照，拍取斑马鱼卵黄囊以下至尾部的照片，聚焦在斑马鱼鱼鳍部位，记录照片和对应的斑马鱼的编号；导出图片至电脑，使用Image测量斑马鱼鱼鳍面积；

F.通过对比含有防晒护肤品养殖水中的斑马鱼鱼鳍与-UV和+UV中斑马鱼鱼鳍面积的大小，对所述防晒护肤品的防晒效果进行检测。

3.如权利要求2所述防晒护肤品防晒功效的检测方法，其特征在于，所述挑选的雌雄斑马鱼为野生型AB系斑马鱼。

4.如权利要求2所述防晒护肤品防晒功效的检测方法，其特征在于，所述(1)中实验前，每晚22:00，挑选一对雌雄斑马鱼于交配盒，用隔板将斑马鱼雌雄分开，夜晚或黑暗状态放置10h；第二天早上8:00抽开隔板，斑马鱼交配产卵；捞出斑马鱼，收集斑马鱼鱼卵。

5.如权利要求2所述防晒护肤品防晒功效的检测方法，其特征在于，所述24孔板置于生化培养箱，培养箱温度为28±0.5℃。