[发明专利]一种猪精液长时间保存方法

说明书

一种猪精液长时间保存方法属于现代生物技术领域，尤其涉及一种猪精液稀释液制备方法以及低温超长时间保存技术。目前猪的精液保存主要以低温液态保存为主。但无法满足一些偏远地区的养猪生产，为了克服现有猪精液保存技术的不足，本发明公开猪精液保存方法，其特征是：第一步，配制精液稀释液，第二步，将采集到的公猪精液与稀释液稀释后加压然后恢复至正常大气压。本发明的猪精液超长时间低温保存技术可以对猪精子起到更好的保护作用，值得在生产中广泛应用。

技术领域

本发明属于现代生物技术领域，尤其涉及一种猪精液稀释液制备方法以及低温超长时间保存技术。

背景技术

随着我国国民经济的飞速发展，生活质量不断的提高，猪肉已成为人们日常生活中不可或缺的肉类食品。由于人们对猪肉需要量的增加，使得中国养猪行业迅猛发展。养猪业的稳定发展对促进整个畜牧业的发展有种极为重要的意义。随着我国养猪业不断集约化、专业化、生态化和科技化，猪的人工授精技术在现代养猪业中受到越来越多科研工作者的关注。

人工授精技术的广泛应用使得精液保存技术的改良显得尤为重要。精液保存技术既可以延长精子的贮存时间，又便于长途运输，同时还可以扩大精液的使用范围，提高公猪的配种效能。冷冻精液虽然可以不受地域和时间的限制且可长时间保存，但其解冻后精子存活率较低，且受胎率较低，目前猪的精液保存主要以低温液态保存为主。但从当前应用的猪精液稀释液来看，精液低温保存时间通常为4-6d，无法满足一些偏远地区的养猪生产，因此，开发一种长效的低温猪精液稀释液对促进偏远地区的养猪业具有重要作用。

发明内容

为了克服现有猪精液保存技术的不足，有必要对猪精液低温保存技术(包括猪精液稀释液的配方和精液保存前处理方法)进行探索研究，本发明公开一种猪精液稀释液制备方法及保存前处理技术。本发明中稀释液配方如下表：

猪精液稀释液配方

注：按上述配方称量后，加双蒸水定容至100mL。

基于本单位发明的猪精液稀释液，在猪的试验中加以调整，对猪精液稀释液前处理技术加以改良，获得更显著的效果。将按照上述配方配置好的稀释液移至密封罐中，利用加压装置冲入4℃空气，在1min内将该密封罐中大气压由1个标准大气增加到1.15个标准大气压，保持15min后，继续冲入4℃空气，在1min内将该密封罐中大气压由1.15个标准大气增加到1.2个标准大气压，保持15min后，恢复至正常大气压。所得稀释液为本发明猪精液低温保存稀释液。

本发明所述的1min指的是55秒到60秒之间。

本发明中的稀释液及保存前处理技术能有效的延长精子存活时间、提高精子活率、提高精子顶体完整性、降低精子畸形率。利用本发明可大大延长精子的贮存时间，又便于长途运输，同时还可以扩大精液的使用范围，提高公猪的配种效能。

具体实施方案

配制精液稀释液：称取2g海藻糖、2.8g蔗糖、150mg脱脂牛奶粉、120mgL-精氨酸、200mg半胱氨酸、600mg维生素C、2.8g柠檬酸、5mg超氧化物歧化酶、量取20mL卵黄、5mL乙二醇、加入20万单位青霉素、20万单位链霉素，加双蒸水定容至100mL。将采集到的公猪精液与在35℃预热后的本发明稀释液按重量比为1：3等温稀释后置于水浴杯中。将水浴杯置于4℃冰箱，2h内缓慢降温至4℃并转移至密封罐中，利用加压装置冲入4℃空气，在1min内将该密封罐中大气压由1个标准大气增加到1.15个标准大气压，保持15min后，继续冲入4℃空气，在1min内将该密封罐中大气压由1.15个标准大气增加到1.2个标准大气压，保持15min后，恢复至正常大气压，即：恢复到1标注大气压或者接近1标注大气压。所得稀释液为本发明猪精液低温保存稀释液。

试验介绍