[发明专利]贝莱斯芽孢杆菌菌株HN03及其应用

说明书

本发明公开了贝莱斯芽孢杆菌菌株HN03及其应用，贝莱斯芽孢杆菌菌株HN03的保藏编号为CCTCC M 2018084。本发明的贝莱斯芽孢杆菌菌株HN03，纯菌对香蕉枯萎病菌1号、4号生理小种及其他多种病原菌都有很好的抑制作用。

技术领域

本发明涉及一株新的贝莱斯芽孢杆菌菌株及其应用。

背景技术

土传病害是由生活在土壤中或残留在土壤的病株残体中的病菌引起的作物病害。土传病在世界范围内非常普遍，通常引起作物枯萎病、立枯病、黄萎病、根腐病、青枯病、根结线虫病和疫病等，这些病害给农业生产带来重大的经济损失，严重制约现代农业的可持续发展。

香蕉枯萎病是由尖孢镰刀菌古巴专化型[Fusarium oxysporum f.sp.Cubense(E.F.Smith)SnyderHansen)引起的一种重要的土传真菌性病害。香蕉作为全球第四大食物贸易商品，且该病对香蕉产业的危害具有世界性、毁灭性等特征，使其成为全球最重要的植物病害之一。从1874年首次报道至今，尽管有多种防治方法的研究，但仍未找到对香蕉实际生产种植过程中，香蕉枯萎病的发生、防控有效的手段。

传统的化学防治方法通常使用化学农药直接喷施继而作用到作物或病原菌。但该方法难以触杀到隐藏在土中及香蕉维管束内部的香蕉枯萎病菌，用溴化甲烷进行土壤熏蒸消毒最长只能维持3年，香蕉枯萎病菌又卷土重来，并且化学药品的施用不仅因病原菌易产生抗性而药效变得更低，也易引起一系列的环境和安全问题，故该防治方法不被推荐来继续研究和使用。抗病品种的选育周期长，目前进展非常缓慢，虽有选育出抗性品种，但其栽培性状出现果实口感差、品质不佳等问题，影响其推广。生物防治手段对环境、人体较为友好，被广大研究者推崇。但目前生物防治尤其是利用拮抗菌，存在着菌株在环境中难存活，难以持续对抗土壤中病原菌，或难以定殖于植物对抗病原菌等缺点。

发明内容

本发明的目的在于提供一株新的贝莱斯芽孢杆菌菌株及其应用。

本发明所采取的技术方案是：

贝莱斯芽孢杆菌菌株HN03，保藏于湖北省武汉市武汉大学内的中国典型培养物保藏中心，保藏名称为贝莱斯芽孢杆菌菌株HN03Bacillus velezensis HN03，分类命名为Bacillus velezensis HN03，保藏编号为CCTCC M 2018084。

一种微生物制剂，包括载体，载体负载有上述的贝莱斯芽孢杆菌菌株HN03。

上述贝莱斯芽孢杆菌菌株HN03在制备微生物病害生物防治菌剂中的应用。

作为上述应用的进一步改进，微生物病害病原菌选自香蕉枯萎病菌4号生理小种、香蕉枯萎病1号生理小种、辣椒枯萎病菌、番茄枯萎病菌、烟草疫霉病菌、葡萄炭疽病菌、诺丽枯萎病菌、释迦枯萎病菌、苜蓿枯萎病菌。

一种香蕉育种栽培基质，包括有机质和上述的贝莱斯芽孢杆菌菌株HN03，有机质选自蚯蚓粪和牛粪中的至少一种。

作为上述香蕉育种栽培基质的进一步改进，基质还含有河沙、椰糠。

作为上述香蕉育种栽培基质的进一步改进，贝莱斯芽孢杆菌菌株HN03初始菌剂、蚯蚓粪的质量比为1：(8～12)。

作为上述香蕉育种栽培基质的进一步改进，贝莱斯芽孢杆菌菌株HN03初始菌剂、蚯蚓粪、河沙、椰糠的质量比为0.1:1:2:86.9。

作为上述香蕉育种栽培基质的进一步改进，贝莱斯芽孢杆菌菌株HN03初始菌剂的培养方法为：

1)将贝莱斯芽孢杆菌菌株HN03接种于NA培养基30℃培养24h后得到发酵种子液；

2)将发酵种子液按1％体积比接种于NA培养基中，30℃、200rpm震荡培养3-5d，得到菌株发酵液；