[发明专利]中华根瘤固氮菌株系H6及其应用

说明书

本发明涉及一种中华根瘤固氮菌株系H6及其应用，所述的中华根瘤固氮菌株系H6于2018年5月7保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心，其简称为CCTCC，保藏编号为CCTCC NO:M2018255。该根瘤固氮菌株系H6是通过苜蓿植株捕捉土壤中的根瘤菌，从新鲜根瘤中对根瘤菌进行分离和纯化所得，并对菌株的16S rDNA部分序列进行测定，通过系统发育分析，确定为中华根瘤菌属（Sinorhizobium）的新菌株系，并命名为H6。本发明所述的根瘤固氮菌株系H6通过砂培回接试验证明：其具有缓解苜蓿盐害，高效固氮的特性，盐处理条件下，接种该根瘤菌能够增加苜蓿生物量，提高植株体内氮、磷、钾含量，可适用于新疆等盐渍化地区，作为苜蓿常规栽培的措施之一。

技术领域

本发明涉及一种中华根瘤固氮菌株系H6(Sinorhizobium sp.)及其应用。

背景技术

自然界中存在一些微生物能将空气中的氮气还原为氨，为微生物和植物提供氮源，这种 现象被称为生物固氮。根据高等植物与固氮微生物之间的关系，将生物固氮分为自身固氮、 共生固氮、联合固氮三个体系。

根瘤菌是一类革兰氏阴性无芽孢的土壤杆菌，能够与豆科植物苜蓿形成互利互惠的共生 关系。这种共生关系具有固氮量大、抗逆性能力强等特点。

紫花苜蓿是家畜的优质牧草，在全球种植面积广泛，有“现金作物”之称，在土壤生态 保护和农业生产中有着不可或缺的重要地位。新疆地处中国西北边陲，独特的气候条件适宜 苜蓿生长，但新疆土壤的盐渍化严重影响苜蓿产量的提高。因此，提高苜蓿耐盐能力对于发 展新疆的苜蓿产业有重要意义。同时很多研究表明，接种根瘤菌可提高苜蓿耐盐性，为了缓 解苜蓿盐害，必须选育耐盐的根瘤菌适应盐渍化土壤，这样才能获得高产。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种中华根瘤固氮菌株系H6及其应用，所述的中华根瘤固氮菌 株系H6于2018年5月7保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心，其简称为CCTCC，保藏 编号为CCTCC NO:M2018255。该根瘤固氮菌株系H6是通过苜蓿植株捕捉土壤中的根瘤菌，从 新鲜根瘤中对根瘤菌进行分离和纯化所得，并对菌株的16S rDNA部分序列进行测定，通过系 统发育分析，确定为中华根瘤菌属(Sinorhizobium)的新菌株系，并命名为H6。本发明所 述的根瘤固氮菌株系H6通过砂培回接试验证明：其具有缓解苜蓿盐害，高效固氮的特性，盐 处理条件下，接种该根瘤菌能够增加苜蓿生物量，提高植株体内氮、磷、钾含量，可适用于 新疆等盐渍化地区，作为苜蓿常规栽培的措施之一。

本发明所述的一种中华根瘤固氮菌株系H6，该中华根瘤菌H6Sinorhizobiumsp.H6属 于中华根瘤菌属，于2018年05月7日保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心CCTCC，保 藏编号为CCTCC NO:M 2018255。

所述的中华根瘤固氮菌株系H6在制备豆科植物共生固氮及缓解盐害中的应用。

本发明所述的中华根瘤固氮菌株系H6于2018年5月7保藏于武汉大学中国典型培养物 保藏中心，其简称为CCTCC，保藏编号为CCTCC NO:M 2018255，地址：中国武汉，武汉大学， 于2016年7月在新疆农业大学三坪实验农场种植的苜蓿根瘤中分离出来的。

所述中华根瘤固氮菌株系H6的特点为：

一、中华根瘤固氮菌株系H6的分离：

1)取新鲜根瘤，用水冲洗干净，并用滤纸吸干表面水分；

2)放入体积浓度为95％的酒精中处理3分钟，取出，用无菌水冲洗5-6次，再放入体积 浓度为0.2％HgCl₂灭菌5分钟，取出，再用无菌水冲洗5-6次；

3)再将新鲜根瘤在火焰灭过菌的载玻片上切成两半，用无菌镊子夹住半个瘤，切口面向 YMA培养基表面划线，YMA培养基的配方如表1所示，倒置后在温度28℃下黑暗培养；