[发明专利]一种低铜福建牡蛎选育系的制种方法

说明书

一种低铜福建牡蛎选育系的制种方法，涉及水产生物遗传育种技术。从同一性成熟福建牡蛎群体中挑选壳型整齐的个体作为基础选育群体暂养；取部分外套膜进行铜含量测定，剩余软体部在低温高湿条件下原位保存；通过电感耦合等离子体质谱法完成外套膜铜含量测定；将亲贝复苏，进行人工受精，受精成功出现极体后洗去多余精子；将群体选育系受精卵置于养殖池中孵化及浮游幼体培育，幼体附着变态后继续培育稚贝；将培育得到的稚贝转移至同一养殖海域进行养殖，获得子一代低铜选育系，9～12个月后子一代发育至性成熟并达到商品规格；从性成熟子一代中选择壳型整齐、大小近似的个体，重复1～2次进行性状固定，获得低铜富集的福建牡蛎新品系。

技术领域

本发明涉及水产生物遗传育种技术，尤其是涉及一种低铜福建牡蛎选育系的制种方法。

背景技术

牡蛎肉味鲜美，营养丰富，是传统的贝类养殖品种之一。福建牡蛎(Crassostreaangulata)又称葡萄牙牡蛎，因其生长快、活力强等特点而被视为优良的牡蛎养殖品种。2016年福建牡蛎产量高达174.66万吨，占全国牡蛎总产量的36.13％(中国渔业年鉴2017)。由此可见福建牡蛎养殖业已成为我国重要的海洋与渔业产业。

随着养殖业发展，福建牡蛎的营养品质和食品安全受到越来越多的关注。牡蛎有很强的铜富集能力，可将海水中铜高效富集于软体部。在洁净海域中福建牡蛎软体部铜含量可达0.1～0.4mg/g干重(史博等，2015)。由于环境变化以及食品结构调整，我国居民膳食营养中铜的推荐日摄取量从2mg/日(2006年)降低到0.8mg/日(2017年)，但是我国居民铜平均每日实际摄取量约为1.9mg，大大超出推荐适宜摄取量。由此可见降低饮食中铜摄取量更符合现在中国国民膳食营养需求，而牡蛎高富集铜的特性与居民低铜膳食需求存在显著矛盾。此外很多近海河口养殖海域面临工业化、生活废水排放造成的重金属污染威胁，而牡蛎在污染海域体内铜富集量甚至高达10mg/g(干重)以上(王文雄等，2011)。无论从满足国民膳食营养需求还是食品安全角度出发，都需要降低牡蛎软体部中铜富集量。

因此培育低铜含量的福建牡蛎新品系是市场变化的需求，对牡蛎养殖业的健康可持续发展具有重要意义。但是目前关于低铜富集性状的牡蛎选育工作依然是一片空白，急需技术突破。

发明内容

本发明的目的在于针对目前福建牡蛎养殖产业中缺乏低铜、优质安全新品种的现状，提供健康、安全、优质的一种低铜福建牡蛎选育系的制种方法。

本发明包括以下步骤：

1)从同一性成熟福建牡蛎群体中挑选壳型整齐的个体作为基础选育群体，暂养3～7天；

在步骤1)中，所述个体可采用大小近似、相同年龄且性腺指数超过50％的福建牡蛎；壳型挑选原则可为：壳长≥10cm，壳高≥3cm，总重近似；所述暂养的条件可为水温25～30℃，盐度25～30，每日投喂2～3次饵料，每次饵料包括角毛藻2～3万细胞/ml、小球藻2～3万细胞/ml、扁藻3～5万细胞/ml，日换水量为1/2，每日水体饵料滤食干净后进行换水以避免精卵排放。

2)从步骤1)的基础选育群体中挑选性腺饱满的个体，取部分外套膜进行铜含量测定，剩余软体部在低温高湿条件下原位保存；

在步骤2)中，所述取部分外套膜的铜含量可以准确表征牡蛎铜富集性状；所述原位保存可采用软体部放置于牡蛎壳中，保持性腺组织完整无损伤，避免生殖细胞流出以影响后续精卵保存，保存温度4～10℃，湿度90％以上；原位保存可以最大限度减少对性腺的损伤，低温高湿环境下性腺为生殖细胞保存提供最适宜的理化条件，可有效保存48h。

3)通过电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法完成外套膜铜含量测定；

在步骤3)中，所述通过电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法完成外套膜铜含量测定，可以10％选择压选取铜含量最低的雌雄各50只作为亲贝；所述铜含量测定的时间可为24～48h，以免影响所保存亲贝的生殖细胞活力。