[发明专利]一种Fmoc氨基酸的分析方法

说明书

本发明属于氨基酸分析技术领域，特别涉及一种Fmoc氨基酸的分析方法，包括以下步骤：步骤1，将Fmoc‑Arg(Pbf)‑OH溶解在乙腈中，所述Fmoc‑Arg(Pbf)‑OH的浓度为2‑10mg/mL；步骤2，将步骤1制得的Fmoc‑Arg(Pbf)‑OH溶液作为样品，进行高效液相色谱分析；所述高效液相色谱的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂，Sinochrom ODS‑BP为色谱柱，采用梯度洗脱，流速1.0‑2.0ml/min，柱温：室温，检测波长为220nm，本发明的方法可以对Fmoc氨基酸：Fmoc‑Arg(Pbf)‑OH进行精准分析，具有灵敏度高、检测限低，检测方法简单、稳定性好、重复性高的优点。

技术领域

本发明属于氨基酸分析技术领域，特别涉及一种Fmoc氨基酸的分析方法。

背景技术

多肽合成过程中氨基酸易发生错接和许多副反应，需要对氨基酸进行保护，合成多肽后再脱去保护基团，即芴甲氧羰酰基(Fmoc)是常见的保护基团。现有技术中，一般通过用Fmoc-Cl或Fmoc-Osu引入Fmoc，合成的Fmoc氨基酸的纯度影响后续合成多肽的产品质量，因此，Fmoc氨基酸的纯度的分析具有重要意义。

现有技术中，氨基酸的分析多采用高效液相色谱(HPLC)，但是不同的HPLC分析条件对不同氨基酸的分析结果准确度产生很大影响。

精氨酸是人体必需的氨基酸，在多肽合成中，为了避免副产物的产生，须对精氨酸的氨基和胍基进行保护；Fmoc-Arg(Pbf)-OH就是利用Fmoc(9-芴甲氧羰基)保护氨基，用Pbf(2，2，4，6，7-五甲基苯并呋喃-5-磺酰基)保护胍基；现有技术中，对Fmoc-Arg(Pbf)-OH未见报道。

发明内容

本发明解决现有技术中存在的上述技术问题，提供一种Fmoc氨基酸的分析方法。

为解决上述问题，本发明的技术方案如下：

一种Fmoc氨基酸的分析方法，所述Fmoc氨基酸为Fmoc-Arg(Pbf)-OH，所述分析方法包括以下步骤：

步骤1，将Fmoc-Arg(Pbf)-OH溶解在乙腈中，所述Fmoc-Arg(Pbf)-OH的浓度为2-10mg/mL；

步骤2，将步骤1制得的Fmoc-Arg(Pbf)-OH溶液作为样品，进行高效液相色谱分析；

所述高效液相色谱的色谱条件为：

以十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂，Sinochrom ODS-BP为色谱柱，采用梯度洗脱，流速1.0-2.0ml/min，柱温：室温，检测波长为220nm，所述梯度洗脱按照下表执行：