[发明专利]一种便携式纸基增强快速检测微生物的拉曼散射方法

说明书

一种便携式纸基增强快速检测微生物的拉曼散射方法。本发明公开了一种纸质增强基底快速检测微生物污染的表面增强拉曼散射方法，包括：提供溶胶溶液；制备纸质增强基底；以及利用纸质增强基底进行拉曼光谱测试；其中所述纸质增强基底的制备包括：将纸质基材利用1％左右的盐酸浸泡过夜，清洗完成后，再用超纯水清洗多次；利用惰性气体吹干清洗后的纸质基材；利用所提供的溶胶溶液来浸泡吹干后的纸质基材；以及将浸泡之后的纸质基材于低温冻存后冷冻干燥，即由此制得纸质增强基底。本发明的纸质增强基底快速检测微生物的表面增强拉曼散射方法集样本富集分离与增强检测信号于一体。

技术领域

本发明涉及微生物检测技术领域，更具体涉及一种快速检测微生物污染的表面增强拉曼散射方法。

背景技术

表面增强拉曼散射(Surface-enhanced Raman Scattering,SERS)光谱作为一种常用的分析方法，具有灵敏度高、检测速度快等优点，可以表征分子的指纹振动光谱，实现对样品的无损测量，广泛应用于生物医学、食品安全、环境监测等领域。SERS的灵敏度、稳定性及可重复性与所用的增强基底性能密切相关。目前常用的SERS刚性基底(如玻璃片、硅片等)存在制备过程复杂、成本高、柔性差、不便携带，不利于大规模推广利用的缺点。另外，用于表面增强拉曼散射的溶胶溶液也存在不稳定性以及不方便携带等缺点。

因此，存在对当前的表面增强拉曼散射检测方法进行改进的需求。

发明内容

研究发现，与目前常用的SERS刚性基底相比，纸质基底生产成本低，制作过程环保，前处理简单，便于大规模生产及商业化；同时，纸基具有薄、轻、灵活方便等优点，便于采集和收集样品，可根据实际需要进行裁剪，实现现场检测；另外，与刚性基底相比，纸质基底表面更为粗糙，可形成三维结构，分布在表面的纳米粒子更多，增强效果更佳。因此，利用纸张作为支撑的SERS纸质基底制备的纸增强“抹布”能有效解决刚性基底存在的问题，极大满足未来分析检测领域快速、便携式以及个性化特点。

因此，本发明的目的在于克服现有技术中存在的上述问题，由此提供一种快速检测微生物污染的表面增强拉曼散射方法，该方法包括：

提供溶胶溶液；

制备纸质增强抹布；以及

利用纸质增强抹布进行拉曼光谱测试；

其中所述纸质增强抹布的制备包括：

将纸质基材利用1％左右的盐酸浸泡，清洗完成后，再用超纯水清洗多次；

利用惰性气体吹干清洗后的纸质基材；

利用所提供的溶胶溶液来浸泡吹干后的纸质基材；

将浸泡之后的纸质基材于低温下冻存后冷冻干燥，由此制得纸质增强基底。

根据本发明的一个实施方案，其中所述溶胶溶液为金溶胶溶液。

根据本发明的一个实施方案，其中所述纸质基材为滤纸及宜吸附液体的类纸质载体。

根据本发明的一个实施方案，其中所述惰性气体为氮气。

根据本发明的一个实施方案，其中所述溶胶溶液浸泡纸质基材的时间为5h-7h,冻存30min左右，冷冻干燥40min左右。

根据本发明的一个实施方案，其中所述低温下冻存的温度为小于-80℃。

根据本发明的一个实施方案，其中所述金溶胶溶液通过如下方法制备：采用柠檬酸钠还原法将0.05％-0.15％的氯金酸溶液置于温度为105℃-130℃的条件下煮沸，加入浓度为20nM-80nM的柠檬酸钠溶液，煮沸10-40min，制得金溶胶溶液。

根据本发明的一个实施方案，其中所述金溶胶的紫外可见最大吸收峰在530nm左右，平均粒径为50nm左右。