[发明专利]一种可同时定量复方穿心莲片中的没食子酸、穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的快速检测方法

说明书

本发明涉及复方穿心莲片中有效成分的检测方法，具体地公开了一种可同时定量复方穿心莲片中的没食子酸、穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的快速检测方法，包括以下步骤：(1)制备标准品溶液；(2)制备供试品溶液；(3)取标准品溶液和供试品溶液上超临界色谱仪检测，同时获得供试品溶液中没食子酸、穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯的含量。本发明采用超临界色谱进行检测，超临界色谱分离能力强，供试品溶液制备时仅仅需要提取，省略了柱层析净化步骤，实验时间由4‑5小时缩短为40‑50分钟，大大提高了工作效率，节省了时间、人力、物力，同时又能对没食子酸、穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯的含量进行精准定量。

技术领域

本发明涉及复方穿心莲片的检测方法，尤其涉及一种可同时定量复方穿心莲片中的没食子酸、穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的快速检测方法。

背景技术

复方穿心莲片是由穿心莲和路边青2味药材制成，具有清热解毒，凉血，利湿的功效。现行的药品标准仅仅有2个鉴别，缺少含量测定项，无法对于该产品进行全面的质量控制。在2015版《中国药典》中，药材穿心莲的标准成分控制穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量测定方法需要提取和用中性氧化铝柱层析进行净化，然后HPLC检测，耗时4小时，且由于前处理的方法过于繁琐、时间过长，容易造成转移不全、经验浅的实验人员难以把握实验药典，导致穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的测定结果不准确；而在各中药标准中，尚未记载路边青的标准控制。路边青的特征成分为没食子酸，现有的次检测方法中并未将该成分也作为复方穿心莲片的控制成分。现有方法多为薄层鉴别、普通高效液相法，且均是一个成分一个方法，在实验时间、提取效率、溶剂损耗、实验上手程度上都不能体现优势，需要一种环保、快速、分离能力强的特点建立穿心莲和路边青同时进行含量测定方法。

发明内容

本发明的目的旨在提供一种可同时定量复方穿心莲片中的没食子酸、穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的快速检测方法。

本发明的目的通过以下技术方案来实现：一种可同时定量复方穿心莲片中的没食子酸、穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的快速检测方法，包括以下步骤：

(1)制备标准品溶液：取没食子酸标准品、穿心莲内酯标准品和脱水穿心莲内酯标准品，加甲醇制成标准品溶液；

(2)制备供试品溶液：取复方穿心莲片样品研成粉末后，采用甲醇提取，得供试品溶液；

(3)取标准品溶液和供试品溶液上超临界色谱仪检测，同时获得供试品溶液中没食子酸、穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯的含量；其中，所述的色谱条件：色谱柱为硅胶柱规格3.0×150mm，3μm；以CO₂-0.1％磷酸溶液为流动相；流速2.5ml/min，检测器为二极管阵列检测器，穿心莲内酯检测波长为225nm，脱水穿心莲内酯检测波长为254nm，没食子酸检测波长为273nm，进样量5μl。

所述步骤(1)中，标准品溶液中没食子酸、穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的浓度均为0.1mg/ml。

所述步骤(2)中，取复方穿心莲片样品粉末1.0g置容器中，加甲醇超声提取，然后冷却至室温后加甲醇定容置10ml，滤膜过滤，获得供试品溶液。具体地，超声提取时间为15～25min。

所述步骤(3)中，CO₂-0.1％磷酸溶液的体积比为85～95:5～15。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

1.本发明采用超临界色谱进行检测，超临界色谱分离能力强，供试品溶液制备时仅仅需要提取，省略了柱层析净化步骤，实验时间由4-5小时缩短为40-50分钟，大大提高了工作效率，节省了时间、人力、物力，同时又能对没食子酸、穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯的含量进行精准定量。

2.本发明以二氧化碳为流动相，替代了普通液相所需要的乙腈和甲醇，在使用成本以及环保方面优势突出。

附图说明