[发明专利]一种用于等离子体金芯片的封闭缓冲液

说明书

本发明提供一种用于等离子体金芯片的封闭缓冲液，包括由牛血清白蛋白、海藻糖、甘氨酸、柠檬酸钠以及Proclin300所混合而成的混合液；在所述混合液中所述牛血清白蛋白浓度为5‑30g/L、所述海藻糖浓度为10‑100g/L、所述甘氨酸浓度为5‑30g/L、所述柠檬酸钠浓度为0.02‑0.2mol/L、所述Proclin300浓度为0.01‑0.2％；且所述混合液pH值范围为6.0‑7.2，本申请可以长时间保持被固定蛋白的生物活性，进一步提高蛋白芯片稳定性，由于混合液的pH值为6.0‑7.2，由此，本申请可以进一步在较长时间内保持被固定蛋白的生物活性。

[技术领域]

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种能延长芯片表面蛋白的保存时间，提高蛋白芯片的稳定性的用于等离子体金芯片的封闭缓冲液。

[背景技术]

目前，临床领域应用的免疫检测方主要有免疫比浊、免疫层析、酶联免疫(Elisa)、化学发光免疫分析(CLIA)，以及近些年发展应用的蛋白芯片-免疫荧光法。蛋白芯片在医疗诊断领域，通过双抗夹心法来达到对疾病相关蛋白含量检测的目的，利用连接于固相载体上的抗体和荧光标记的抗体分别与待测样本中被检测抗原分子上两个抗原决簇结合，形成抗体-抗原-荧光染料标记的抗体复合物由于反应系统中固相抗体与标记抗体相对待测抗原过量，所以在监测范围内，复合物的量与待测抗原成正比，通过测定复合物中荧光的信号值，即可测定抗原含量。由于微量生物活性物质(如抗原或抗体)固定到芯片上后很容易丧失活性，蛋白芯片法都涉及到一项关键的技术，即保持蛋白芯片的稳定性。

等离子体材料通常指的是贵金属(例如金)及其复合物，其在特定波长范围内的光照下具有独特的表面等离子体共振效应。因为具有特定的结构和表面化学性质，这种等离子体材料在近红外区(NIR-FE，650-1700nm)具有荧光增强效应，通过微量点样技术在这种材料上固定特定的蛋白(抗体或抗原)，可实现生物标志物的检测。值得注意的是，目前常用的等离子体金芯片芯片封闭缓冲液是磷酸盐缓冲液，这类缓冲液只能对芯片上的蛋白质起保湿作用，短时间内防止因过度干燥而引起的蛋白质失活，并不能长期有效地保持其生物活性。保持芯片上蛋白质活性的方法通常是将芯片长期保存在-20℃以下的环境中，并且不能冻融，而在2-8℃冰箱存放一周或37℃破坏一天，其生物活性就损失了50％以上。可见，相关技术中存在蛋白质在芯片上易失活、稳定性差的问题。

[发明内容]

为克服现有技术所存在的问题，本发明提供一种能延长芯片表面蛋白的保存时间，提高蛋白芯片的稳定性的用于等离子体金芯片的封闭缓冲液。

本发明解决技术问题的方案是提供一种用于等离子体金芯片的封闭缓冲液，包括由牛血清白蛋白、海藻糖、甘氨酸、柠檬酸钠以及Proclin300所混合而成的混合液；在所述混合液中所述牛血清白蛋白浓度为5-30g/L、所述海藻糖浓度为10-100g/L、所述甘氨酸浓度为5-30g/L、所述柠檬酸钠浓度为0.02-0.2mol/L、所述Proclin300浓度为0.01-0.2％；且所述混合液pH值范围为6.0-7.2。

优选地，所述牛血清白蛋白浓度为5-15g/L。

优选地，所述海藻糖浓度为20-50g/L。

优选地，所述甘氨酸浓度为10-20g/L。

优选地，所述柠檬酸钠浓度为0.05-0.2mol/L。

优选地，所述Proclin300浓度为0.05-0.15％，更优选为0.1-0.15％。

优选地，所述牛血清白蛋白浓度为10-15g/L。

优选地，所述海藻糖浓度为30-50g/L。

优选地，所述甘氨酸浓度为10-15g/L。

优选地，所述柠檬酸钠浓度为0.05-0.1mol/L。