[发明专利]贝莱斯芽孢杆菌及其作为水产病原菌抑制剂的应用

说明书

本发明提供一种贝莱斯芽孢杆菌及其作为水产病原菌抑制剂的应用，该菌分离自健康罗非鱼的肠道，该菌株保藏编号为：GDMCC No.60344。该菌具有广谱拮抗水产常见病原菌功能，能有效抑制无乳链球菌、海豚链球菌、鰤鱼诺卡氏菌、嗜水气单胞菌、舒氏气单胞菌和迟缓爱德华氏菌等病原菌的生长，而且使用安全无残留，有助于减少化学药物在水产养殖中的使用量和残留量，降低生产成本，实用性强等优点。

技术领域

本发明涉及水产微生物应用技术领域，具体涉及一种贝莱斯芽孢杆菌及其作为水产病原菌抑制剂的应用。

背景技术

我国水产养殖产量连续多年位居世界首位，水产养殖不仅给人们提供了丰富的蛋白质来源，而且有效增加了渔民的收入，在我国农业发展过程中扮演着重要角色。由于多年来，我国水产养殖过程中不断追求集约化、高密度养殖以及药物的频繁使用等原因，导致水产养殖动物疾病频繁暴发，制约着我国水产养殖业健康可持续发展。其中，水产养殖过程中常见的细菌性病原主要有嗜水气单胞菌、维氏气单胞菌、舒氏气单胞菌、哈维氏弧菌、溶藻弧菌、迟缓爱德华氏菌、鮰爱德华氏菌、鰤鱼诺卡氏菌、无乳链球菌、和海豚链球菌等，这些病原菌在我国水产养殖动物中广泛流行，常常造成水产经济动物相关病害的大规模暴发。

当前，我国水产养殖中常见细菌性病害主要是通过使用抗生素、消毒剂等传统的化学药物进行防治防控，虽然在短时间内可以取得较好的效果，但是长期使用会造成耐药因子的传递从而导致病原菌耐药性的产生，并且破坏和干扰养殖环境的微生生态平衡，增加水生动物疾病防控的难度。此外，抗生素、消毒剂等药物易在养殖动物体内及环境中残留，不仅污染环境，而且威胁着人类身体健康。因此，寻求高效无公害的抗生素替代物是十分迫切的，而且具有重要的现实意义。由于拮抗益生菌不仅能够抑制病原菌的生长，同时可改善养殖生态环境，增强养殖动物的机体免疫力，提高鱼、虾的成活率和生长速度，而且具有不产生耐药性、无残留、无污染、无毒副作用等优点，是抗生素药物的理想替代品，因此有效使用拮抗益生菌是水生经济动物疾病防控的一个重要途径。

微生态防治的措施之一是利用拮抗益生菌抑制病原菌的生长，使病原菌的浓度低于其致病浓度，从而达到防治疾病的目的。潜在拮抗益生菌的筛选通常是进行体外拮抗实验，寻找具有抑菌活性的目标菌株，其筛选原理主要是基于抑菌物质在固体或半固体培养基上扩散，抑制指示菌的生长，从而形成透明的抑菌圈。常用的筛选方法主要有点种法、纸片法和牛津杯法等。在拮抗益生菌的应用中，不仅要考虑拮抗菌对相关病原的拮抗效果，还需要考虑拮抗菌对养殖生物的安全性，拮抗益生菌的筛选是其应用的关键，直接决定其应用效果。因此，筛选的益生菌应具备不含有毒力基因和抗性基因，对宿主和生存环境起到积极作用，能够被宿主通过摄食等方法接受并能够在肠道定植等要求。

拮抗益生菌防控水产动物疾病己成为当今研究的热点，但是其相关研究仍然十分有限，尤其是我国水生动物疾病的拮抗益生菌筛选工作进展缓慢，至今，只有少数相关报道。如刘观斌等筛选了1株罗非鱼无乳链球菌的拮抗菌—蜡样芽胞杆菌(NY-5)，其能有效抑制罗非鱼源无乳链球菌的生长(刘观斌,王淼,卢迈新,等.一株能抑制罗非鱼源无乳链球菌的反硝化芽孢杆菌的筛选鉴定[J].2016,23(1):207-217.)；赵光军筛选了2株罗非鱼无乳链球菌的拮抗菌—枯草芽抱杆菌(HAINUP40)和苏云金芽抱杆菌(HAINUP96)，抑菌效果良好，且对罗非鱼鱼体安全无毒(赵光军.拮抗菌的筛选及其对无乳链球菌粘附罗非鱼粘液的拮抗作用研究[D].海南大学,2014.)；陈辉报道了1株罗非鱼海豚链球菌的拮抗菌—诺卡氏菌N0906，其能显著提高罗非鱼非特异性免疫力，降低罗非鱼养殖水体中海豚链球菌的数量，提高罗非鱼的成活率(陈辉.海豚链球菌高效拮抗菌的筛选、特性分析及其生态效应研究[D].南京农业大学,2008.)。因此，有关水生动物疾病防控的益生菌筛选及应用相关研究基础薄弱，能够用于病害防控的拮抗益生菌十分匮乏，远远不能满足当前水生动物疾病防控的迫切需求。