[发明专利]一种快速筛选并大规模培养个性化工业污水处理菌的方法

权利要求书

1.一种快速筛选，并获得大批量个性化工业污水处理菌的方法，其特征在于包括如下过程：

(1)以目标工业污水为选择压力，并设定选择浓度，配制不同选择压力的细菌培养基；

(2)以目标工厂污水处理曝气池所用活性污泥为筛选标本，用(1)中的筛选培养基进行连续10倍稀释，直至细菌计数每毫升液体中含活菌数为30000个/ml；

(3)将稀释好的菌液接种到含筛选培养基的三角瓶中，放入恒温摇床培养，培养条件为：35摄氏度，250转/分钟，培养12小时；

(4)将(3)中培养好的菌液以1:10的比例转接到筛选培养基中，然后按照(3)的培养条件继续培养；

(5)按照(4)的方式，重复接种培养菌液n次(n＜10)，直至经过培养，菌液OD600达到大于等于3.0即可作为初筛成功的菌种，保存备用；

(6)将初筛出的菌液接种到目标工业污水中复筛，按照(3)中的条件进行适应性培养，培养后COD清除大于50％的菌群即可保存，作为大规模培养的菌种；

(7)以优化的细菌限制性培养基为基质，加入选择压力，在发酵罐中制成发酵培养基待用，接种(6)中保存的菌种，采用分批补料方式获得高密度的菌体；

(8)(7)中获得的菌体，经离心收集后，烘干即可。

2.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(1)配制不同选择压力的细菌培养基：到污水处理厂现场采取即将进入曝气池的污水用定性滤纸过滤后备用，然后将细菌培养基与准备好的污水以不同比例混匀即制成筛选培养基，污水在筛选培养基中的比例范围从20％到75％。

3.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(1)所用的细菌培养基组成为：胰蛋白胨：20克/升、酵母粉：10克/升、氯化钠：20克/升。

4.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(2)污泥接种前预处理处理方法为：从目标污水处理厂曝气池内多点采取活性污泥，用筛选培养基溶解稀释后，首先用定性滤纸把溶液中颗粒物去除，然后用LB培养基将细菌稀释到30000个菌/ml备用。

5.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(6)用目标污水对初筛出的菌群进行复筛，主要考察两个指标：1)菌群是否在目标污水中生长旺盛。2)菌群污水处理能力是否达标，即COD去除大于50％。

6.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(7)所采用限制性培养基组成为：磷酸氢二钠：25克/升、磷酸二氢钾：10克/升、氯化钠：0.7克/升、氯化铵：4克/升、胰蛋白胨：7克/升、硫酸镁：1克/升、葡萄糖：20克/升，然后再准备补料葡萄糖与氨水。

7.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(7)所采用的分批补料条件为：将培养好的种子液(OD600＝3左右)加入罐中，调整起始参数为，35摄氏度、150转/分钟、溶氧100％，开始发酵，10小时后开始流加补料，补料流加完毕后，待溶氧出现大幅度上升，并持续在高位时，停止发酵，收集菌体。