[发明专利]3-羟基丁酸酯的非有机溶剂提取方法

权利要求书

1.一种3-羟基丁酸酯的非有机溶剂提取方法，其特征在于，包括以下步骤：

微波辐照处理产生3-羟基丁酸酯的干菌体，然后用蒸馏水溶解经微波辐照的干菌体，获得菌液；

将所述菌液依次进行高温处理、低温处理和冻融破碎处理，之后自所述菌液中提取纯化3-羟基丁酸酯。

2.如权利要求1所述的3-羟基丁酸酯的非有机溶剂提取方法，其特征在于，所述微波辐照采用微波频率300～1500MHz；间歇性微波辐照1～3次，一次辐照时间为1～5min，一次微波辐照结束至下一次微波辐照开始间隔时间为5～15min。

3.如权利要求1所述的3-羟基丁酸酯的非有机溶剂提取方法，其特征在于，所述微波辐照采用微波频率800～1000MHz；间歇性微波辐照2～3次，一次辐照时间为2～3min，一次微波辐照结束至下一次微波辐照开始间隔时间为8～12min。

4.如权利要求1所述的3-羟基丁酸酯的非有机溶剂提取方法，其特征在于，所述用蒸馏水溶解经微波辐照的干菌体具体操作为：按重量份数计量，将1份干菌体溶解在20～30份蒸馏水中得到所述菌液；

所述高温处理为将所述菌液用80～100℃的高温处理1～5min；所述低温处理为将高温处理的所述菌液迅速转入冰水中冷却至室温；所述冻融处理包括冷冻处理和融解处理，所述冷冻处理为将低温处理的所述菌液放置入-20℃冰箱中冷冻12～24h。

5.如权利要求4所述的3-羟基丁酸酯的非有机溶剂提取方法，其特征在于，向冷冻处理后的所述菌液中加入阴离子表面活性剂进行溶解处理；

向溶解处理后的所述菌液中加入次氯酸钠进行提取纯化3-羟基丁酸酯。

6.如权利要求5所述的3-羟基丁酸酯的非有机溶剂提取方法，其特征在于，所述阴离子表面活性剂为十二烷基硫酸钠，即SDS；

对冷冻处理后的所述菌液进行融解处理，具体步骤为：向冷冻处理的所述菌液中加入2～4mL质量浓度为10g/L的SDS，然后置于50～60℃下加热10～18min进行融解处理，获得混合液；融解处理结束后，将所述混合液在7000～9000rpm的转速下离心15～20min，弃上清得到沉淀物；向所述沉淀物中加入蒸馏水2～3次进行水洗，每次加蒸馏水水洗后在8000～10000rpm转速下离心15～20min并弃去上清，最后得到富含3-羟基丁酸酯的第一颗粒物；每次所加蒸馏水的总量为所述混合液的液体体积的1～2倍。

7.如权利要求6所述的3-羟基丁酸酯的非有机溶剂提取方法，其特征在于，向所述富含3-羟基丁酸酯的第一颗粒物中加入固体次氯酸钠，再置于30～35℃中加热2～5min后，立即加入一定量的蒸馏水溶解；待完全溶解后，继续加入蒸馏水2～3次进行水洗，每次入蒸馏水后于7000～9000rpm的转速下离心10～15min并弃去上清，最后得到提取纯化的富含3-羟基丁酸酯的第二颗粒物；其中，加入所述固体次氯酸钠的总量，按重量分数计量为：1份富含3-羟基丁酸酯的第一颗粒物中加入1～2份质量分数为30％的固体次氯酸钠。

8.如权利要求7所述的3-羟基丁酸酯的非有机溶剂提取方法，其特征在于，对所述富含3-羟基丁酸酯的第二颗粒物用丙酮、乙醇各洗涤1～2次进一步纯化，然后再自然干燥或者60～70℃烘干，得到相对纯度高的3-羟基丁酸酯。